湖南RPMI1640培养基采购

    培养实例2和对比培养例2的培养结果比较：兰兹贝格型拟南芥种子在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100％；在相同条件下培养28d时，与1/2ms生长培养基相比，1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳，在平均株高、莲座叶大小、根长、花朵数量等方面均优于1/2ms生长培养基；并且，采用上述培养方法，不论是1/2cs生长培养基还是1/2ms生长培养基，均能获得形态完整的花粉，且花粉活力高达％，其特点在于选择了兰兹贝格型拟南芥作为培养对象，且选择了高度适中的培养盒进行培养，克服了传统培养方法无法获得拟南芥整个生育期无菌苗的缺点，所获无菌花***可直接用于花*离体培养等研究内容。如图2所示。培养实例3：油菜无菌苗培养与培养实例1不同的地方在于：步骤(1)所用种子为中双11号油菜种子，其余完全同培养实例1。1/2cs生长培养基的培养结果为：中双11号油菜种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100％，培养9d的幼苗，表现为植株健壮、平均株高为，叶色浓绿，茎秆粗壮、平均茎中粗为，根系发达、平均根数为(>)、平均主根长为。如图3所示。对比培养例3：将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基，其余完全同培养实例3，1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。使用减血清培养基减少了实验中血清带来的变异性。湖南RPMI1640培养基采购

    在工作台上把已经冲洗干净的外植体浸入75％酒精中消毒30s，用无菌水冲洗3～4次，使用白猫漂白水和无菌水按1：4的体积比配制消毒液，将外植体放入消毒液浸泡40min。通过采用上述技术方案，这种方式对外植体消毒方法简单，能够**降低外植体的死亡率，消毒成活率较高。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s1中，外植体选择为**绣球的枝芽饱满的半木质化枝条茎尖部分。综上所述，本发明包括以下至少一种有益技术效果：本发明通过液体**培养技术，以芽为原材料，获取方便，增殖倍率高达8～10倍，生根率达到95％以上，苗木规格整齐，性状保持稳定，同时节省成本，适合工厂化大规模生产质量绣球种苗。附图说明图1是绣球的液体培养基组培快繁方法的流程示意图。具体实施方式以下结合附图对本发明作进一步详细说明。实施例：参照图1，为本发明公开的一种绣球的液体培养基组培快繁方法，具体步骤如下：(一)、试验材料：供试材料采自江苏东郁植物科技有限公司苗圃的**绣球，品种为无尽夏(endlesssummer“bloomstruck”)，外植体选用当年生枝芽饱满的半木质化枝条茎尖部分。(二)、试验方法：绣球**培养过程按以下步骤进行：初代培养、继代培养、生根培养。。云南DMEM/F12培养基联系方式无酚红培养基在细胞实验中减少了不必要的干扰。

    从而使培养基的预热、加热**及冷却过程可在同一设备内完成。该流程的加热和冷却时间比喷射加热连续**流程要长些，但由于在培养基的预热过程同时也起到了**后培养基的冷却，因而节约了蒸汽和冷却水的用量。（2）蒸汽直接喷射型的连续**系统流程中采用了蒸汽喷射器，它使培养液与高温蒸汽直接接触，从而在短时间内可将培养液急速升温至预定的**温度然后在该温度下维持一段时间**，**后的培养基通过一膨胀阀进入真空冷却器急速冷却，从图中可以看出，由于该流程中培养基受热时间短，营养物质的损失也就不很严重，同时该流程保证了培养基物料**先出，避免了过热或**不彻底等现象。（3）由连消塔、维持罐和喷淋冷却组成的**系统连续**的基本设备一般包括：①配料预热罐，将配制好的料液预热到60-70℃，以避免连续**时由于料液与蒸汽温度过大而产生水汽撞击声；②连消塔，连消塔的作用主要是使高温蒸汽与料液迅速接触混和，并使料液的温度很快升高到**温度（126-132）℃；③维持罐，连消塔加热的时间很短，光靠这段时间的**是不够的，维持罐的作用是使料液在**温度下保持5-7min，以达到**的目的；④冷却管，从维持罐出来的料液要经过冷却排管进行冷却。

    将蒸过的原料置于室温下过夜，未被杀死的孢子便发芽生长，芽孢发育成营养细胞，再30min便可杀死。如此连续反复进行2-3次，亦可达到彻底**的目的。3、分批**的操作分批灭歇是在所用的发酵罐或其他培养装置中进行的，它是在配制罐中配好培养基后，通过**管道输入发酵罐等培养设备中，然后开始**。在进行培养基的间歇**之前，通常先将发酵罐等培养装置的分空气过滤器进行**，并且用空气将分过滤器吹干。开始**时，应先放去夹套或蛇管中的冷水，开启排气管阀，通过空气管向发酵罐内的培养基通入蒸汽进行加热，同时，也可在夹套内通蒸汽进行间接加热。当培养基温度升到70℃左右时，从取样管和放料管向罐内通入蒸汽进一步加热，当温度升至120℃，罐压为1*105Pa（表压）时，打开接种、补料、消泡剂、酸、碱等管道阀门进行排汽，当然在保温过程中，应注意凡在培养基液面下的各种进口管道都应通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道则应排放蒸汽，这样才能不留死角，从而保证**彻底。保温结束后，依次关闭各排汽、进汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，向罐内通入无菌空气，在夹套或蛇管中通冷水降温，使培养基的温度降到所需的温度，进行下一步的发酵和培养。MEM培养基是细胞生物学研究中的基础培养基之一。

    附图说明图1是1/2cs和1/2ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养的对比效果图，a：无菌苗在培养基中生长情况；b：无菌苗莲座叶及根系发育；c：萌发率；d主根长度；a和b中bar＝；图2是1/2cs和1/2ms两种培养基上，兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌植株地上部分及根系发育；c：无菌植株花***发育(左)和花粉的亚历山大染色(右)；d：主根长度；e：株高；f：莲座叶长度；g：成熟花粉活力；a中bar＝、b中bar＝、c中花***bar＝、c中花粉bar＝15um；图3是1/2cs和1/2ms两种培养基上，油菜无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：主根长；f：大于；a中bar＝、b中bar＝；图4是1/2cs和1/2ms两种培养基上，马铃薯无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：根数；a和b中bar＝；图5是cs和ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导的对比效果图，a：叶片愈伤**；b：叶片愈伤**诱导率；c：根愈伤**；d：根愈伤**诱导率；a和c中bar＝；图6是cs和ms两种培养基上。MEM培养基提供了丰富的营养成分，支持细胞的快速增殖。云南DMEM/F12培养基联系方式

MEM培养基常用于多种哺乳动物细胞的体外培养。湖南RPMI1640培养基采购

    如何正确地使用培养基及**大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长，对每个培养者都很重要。培养基的使用依不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。细胞培养液的构成细胞培养液指细胞生长的液体环境，一般指完全培养液，添加了血清、水解乳蛋白、各种添加剂等可以直接使用的培养液。细胞培养基&血清模式血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的，因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养，如MEM培养基，较为常用的量为5％～10％的比例，而特殊的低血清培养基血清量可降至3％左右，细胞的形态和功能不受影响。细胞培养基&乳欧液模式化学合成培养基现虽已大规模使用，但在某些培养领域水解乳蛋白仍在使用，以补充培养液中缺乏的氨基酸、小肽物质。较为常用的方式是用汉氏（Hanks’BSS）或欧式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白（一般为5‰浓度），即成乳汉（欧）液，再与化学合成培养基（一般为MEM）按比例混合使用（如1：1）。细胞培养基&各类添加剂（生长因子等）模式成分复杂的培养基还含有许多化合物，包括蛋白质、多肽、核苷、柠檬酸循环的中间产物、**酸及脂类等。湖南RPMI1640培养基采购