中国香港RPMI1640培养基常用知识

    三)、试验结果：初代培养：使用本发明的消毒方法，消毒成功率能达到80％，诱导培养基萌芽率能达到90％，可以成功建立无菌再生体系。继代培养：使用本发明的增殖培养基，绣球组培苗增殖倍率能够达到8～10倍，组培苗高度一致，生长健壮。生根培养：使用本发明的生根培养基，绣球组培苗生根率能够达到95％，根系发达，健壮，可以成功用于移栽大棚。本发明所指ms培养基是murashige和skoog研制的培养基，其成分配方表见表1。1/2ms培养基是指大量元素含量为ms培养基的一半，其他成分用量相同。表1、ms培养基成分表本发明涉及的植物生长调节剂有：6-ba—6-苄氨基嘌呤；ga3—赤霉素；iba—吲哚丁酸，naa—萘乙酸。本发明中的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均为液体培养基。本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例，并非依此限制本发明的保护范围，故：凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围之内。减血清培养基提高了实验结果的可靠性。中国香港RPMI1640培养基常用知识

    由于培养基的间歇**不需要专门的**设备，投资少，对设备要求简单，对蒸汽的要求也比较低，且**效果可靠，因此，间歇**是中小型生产工厂经常采用的一种培养基**方法。（三）、培养基的连续**1、定义：连续**也叫连消，将配制好的并经预热（60～75℃）的培养基用泵连续输入由直接蒸汽加热的加热塔，使在短时间内达到**温度（126～132℃）。然后进入维持罐（或维持管），使在**温度下维持3～7分钟后再进入冷却管，使其冷却至接种温度并直接进入已事先**（空罐**）过的发酵罐内。其温度一般以126～132℃为宜，总蒸汽压力要求达到～MPa以上。培养基采用连续**时，需在培养基进入发酵罐前，直接用蒸汽进行空罐**（空消），用无菌空气保压，待培养基流入罐后，开始冷却。**时对培养基的加热可采用各种加热器。培养基的冷却方式有喷淋冷却式、真空冷却式、薄板换热器式几种方式，其过程均包括加热、维持和冷却阶段。2、连续**的流程：（1）由热交换器组成的**系统流程中采用了薄板换热器作为培养液的加热和冷却器，蒸汽在薄板换热器的加热段使培养液的温度升高，经维持段保温一定时间后，培养基在薄板换热器的冷却段进行冷却。山东MEM培养基价格对比使用减血清培养基能提高实验的可重复性。

    微量元素在细胞内通常以与有机物结合的形式存在。其中铁在细胞中参与氧的转运；钴是维生素B12的组成部分，参与叶酸的合成和脂肪酸的合成；镍能够***脱氧核糖核酸酶、乙酰辅酶A合成酶等在细胞内具有重要功能的酶，还具有稳定核酸结构的功能；亚硒酸钠中的硒，作为谷胱甘肽过氧化物酶的辅基，具有抗过氧化物能力，参与消除细胞内的脂肪酸过氧化物，提高细胞的生长速率和活性。在低血清、无血清细胞培养基中，为满足细胞生长增殖需要，常常添加一些成份：蛋白质、多肽、核苷、嘌呤、柠檬酸循环的中间产物、脂类、及一些血清替代因子等。其中蛋白质具有重要的作用，动物细胞对许多物质（难溶于水的离子或脂类物质）的摄取需要借助蛋白质的传递作用，如白蛋白、传递蛋白、贴壁蛋白等能够携带脂肪酸、***、矿物质等促进细胞生长。转铁蛋白是一种重要的传递蛋白，能够结合铁，促进细胞对铁离子的吸收，并具有***作用，其促生长作用可能与其具有生长因子的功能有关。胰岛素可促进细胞对葡萄糖和氨基酸的利用，商业化中一些生长因子以重组蛋白形式添加到培养基中，主要用来刺激细胞增殖，并可促进糖元和脂肪酸的合成。乙醇胺是一种重要的刺激细胞生长的化合物，是脑磷酸的合成前提。

    4、本发明植物**培养基，其不含碘化钾，在绝大多数植物中，碘元素不是必需元素，实验发现去除碘化钾对植物**培养没有影响，并且植物在脱离培养基进行后期培养时仍可以从土壤等基质中富集碘元素，去掉碘化钾成分，也简化了培养基配制过程。5、本发明植物**培养基，其用nafeedta取代na2·edta和feso4·7h2o，该替换减少的**根离子通过适当增加**铵成分来补充，该替换主要基于两个特征，一方面，nafeedta是可溶性螯合铁，更容易被植物吸收，有利于植物叶绿体发育，另一方面，发明人发现，na2·edta和feso4·7h2o水溶液ph偏酸是ms、b5和n6等众多植物**培养基原始ph偏低及ph波动大的主要原因，本发明培养基中使用nafeedta之后，经ph为，而植物**适宜生长的ph一般为，因此，使用nafeedta既促进了植物对铁离子的吸收，又有利于培养基ph的稳定。6、本发明植物**培养基，其配方降低了mnso4·h2o、znso4·7h2o、h3bo3、cocl2·6h2o、na2moo4·2h2o的用量，增加了cuso4·5h2o、烟酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇的用量，该改变特征在于，有效减少愈伤**玻璃化发生，减少酚类物质产生，提高愈伤**的出愈率，实验发现，优化后的培养基出愈时间提前，对多种植物的愈伤**诱导是有益的。无酚红培养基确保了实验结果的高度准确性。

    cs液体培养基和1/2cs液体培养基在用不同ph超纯水(ph为)配制时的ph都较为稳定，在未调ph的情况下，可直接用于多种植物培养。如图8所示。(2)以克新18号马铃薯无菌苗为例，观察在未调ph和将ph调至：a、培养基制作方法：随机选取超纯水，测得其ph为，用于配制8种不同的液体培养基。第一种：1/2ms未调ph液体培养基，其为取1/2ms基本培养基置于ph为；第二种：1/2cs未调ph液体培养基，其为取1/2cs基本培养基置于ph为；第三种：ms未调ph液体培养基，其为取ms基本培养基置于ph为；第四种：cs未调ph液体培养基，其为取cs基本培养基置于ph为；第五种：1/，其为取1/2ms基本培养基置于ph为，调ph至；第六种：1/，其为取1/2cs基本培养基置于ph为，调ph至；第七种：，其为取ms基本培养基置于ph为，调ph至；第八种：，其为取cs基本培养基置于ph为，调ph至。b、培养方法：从培养实例4所述培养基获得长势**的马铃薯幼苗，在清水中缓苗2-3d后选取长势一致的马铃薯幼苗，如图9-a所示，置于上述8种不同液体培养基8d，每隔2d更新1次液体培养基；于温度22-23℃、湿度50-70％、光照强度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照时间14h、黑暗时间10h)条件下培养。MEM培养基在药物筛选中有重要作用。中国澳门MEM培养基包括

减血清培养基减少了血清对细胞的影响。中国香港RPMI1640培养基常用知识

    培养实例7和对比培养例7的诱导结果比较：：用上述方法进行水稻成熟胚愈伤**诱导时，cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的愈伤**形态大小均相近，出愈率均为100％。如图7所示。培养实例8：液体培养基在植物水培中的应用(1)用不同ph的超纯水配制的液体培养基ph值稳定性比较：a、用不同ph的超纯水配制液体培养基：通常多种因素会导致相同超纯水制水机产出的超纯水ph变动较大，ph通常为。分别选取ph为、、、、、，分别配制ms液体培养基、cs液体培养基、1/2ms液体培养基、1/2cs液体培养基，制作方法为：ms液体培养基为取ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l；cs液体培养基为取cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l；1/2ms液体培养基为取1/2ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l；1/2cs液体培养基为取1/2cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l。b、结果为：用ph为，ms液体培养基ph为，cs液体培养基ph为，1/2ms液体培养基ph为，1/2cs液体培养基ph为。植物**适宜生长的ph一般为，观察可知，ms液体培养基及1/2ms液体培养基的ph偏酸性且波动较大，其应用于液体培养基时通常需要调节ph，过程繁琐，相比之下。中国香港RPMI1640培养基常用知识