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    包括以下步骤：在培养体系中添加改造抗体；所述改造抗体为将互补决定区以外的区域经过蛋白质改造的细胞培养用抗体，所述改造抗体与fc受体的亲和力低于未经过蛋白质改造的细胞培养用抗体与fc受体的亲和力。本发明还披露了一种改造抗体，所述改造抗体为将互补决定区以外的区域经过蛋白质改造的细胞培养用抗体，所述改造抗体与fc受体的亲和力低于未经过蛋白质改造的细胞培养用抗体与fc受体的亲和力。本发明还披露了一种细胞培养基，包含基础培养基和所述改造抗体。本发明还披露了一种细胞产品，所述细胞产品为根据上述细胞培养方法得到的细胞产品。本发明还披露了一种上述细胞产品在制备对肿*细胞具有杀伤作用的*物和试剂中的应用。本发明还披露了一种用于*症***的*物，包括上述细胞产品。本发明还披露了一种用于异体细胞***的*物，包括上述细胞产品。基于上述技术方案，本发明具有以下有益效果：该发明适用于已建立的细胞培养工艺，对细胞培养用抗体的原有机制没有变动，对培养工艺不需要做大的改动。特别适合目前***使用的大规模细胞培养工艺中将细胞培养用抗体直接加入培养基的情况，操作简便。本发明可以提高细胞培养用抗体在细胞培养体系中的稳定性。1640培养基能够支持多种细胞系的稳定生长。中国澳门细胞培养基大概价格多少

    7)溶液应在2℃－8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。2）配制可高压**细胞培养基(1)根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体积的95％，轻微搅拌溶解。(2)在121℃、15psi下**15分钟。(3)待溶液冷却至室温，加入无菌mol/LL－谷氨酰胺溶液规定体积、无菌％（w/v）碳酸氢钠溶液规定体积，加注射用水（20℃～30℃）至规定体积，混匀。(4)如果必要，用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至所需值。(5)溶液应在2℃－8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。注意事项1）细胞培养用水一般为三蒸水（经石英蒸馏器蒸馏）或超纯水，医*生产上一般为注射用水。2）建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用，因为包装一旦打开，组分可能会变质或因受潮而结团。3）溶解干粉培养基时先加入终体积90％－95％的培养用水，添加剂加完后再补足。4）如需添加的组分较多时，某一组分完全溶解后，再添加另一组分。5）待培养基完全溶解后再加入碳酸氢钠，以免产生沉淀。6）所有成分完全溶解后，培养基应立即过滤或高压**，以免产生沉淀或有微生物污染。7）在过滤**时。上海DMEM高糖细胞培养基哪家好无酚红培养基在实验中减少了潜在毒性。

    552851)、apc-cy7mouseanti-human-cd16(bdbiosciences，557758)、pemouseanti-human-cd56(bdbiosciences，555516)进行流式细胞检测。结果讨论试验组扩增获得的细胞中cd3-cd56+的nk细胞占比为％(图10a)，高于对照组获得的％(图10b)。在这群细胞中，cd3-cd16+cd56+的nk细胞占比分别是％(图10c)和％(图10d)。那么，在总细胞群中，利用试验组扩增获得的cd3-cd16+cd56+的nk细胞可达到总细胞的％，优于用对照组获得的％。结果显示，利用试验组抗体获得的nk细胞产品的纯度更高。三、细胞产品应用应用实例1nk细胞产品对肿*细胞的体外杀伤活力检测本测试用培养实例3中的试验组扩增获得的nk细胞产品(试验组)和对照组扩增获得的nk细胞产品(对照组)分别对淋巴*细胞系raji、乳腺*细胞系bt-474、乳腺*细胞系mcf7进行直接杀伤和adcc杀伤试验，通过对终产品活力分析来比较改造抗体和原型抗体的活力。材料：raji细胞(atcc，ccl-86)，bt-474细胞(atcc，crl-3247)，mcf7细胞(atcc，htb-22)，检测试剂盒cytotoxnon-radioactivecytoto***cityassay(promega，g1780)，培养基rpmi1640(thermofisher，11879020)，利妥昔单抗ritu***mab，曲妥珠单抗trastuzumab。检测方法传代培养肿*细胞。

    培养至第12～20天收获细胞，计数。结果讨论在一个为期12天的试验中，志愿者1(do**)的pbmc在使用acd3-sh时可以扩增(图9a，空心圆圈)，而使用okt3时可以扩增(图9a，实心圆)。在对志愿者2(donor2)pbmc的19天扩增试验中，分别是491倍和251倍(图9b)。结果显示，改造抗体acd3-sh具有更高的激发nkt细胞扩增的活力。培养实例3nk细胞特异性扩增和纯度检测本测试取志愿者提供的血样，分离pbmc后平均分为2份，分别用改造获得的改造抗体acd3-sh、acd16-sh和acd52-sh(试验组)和原型抗体okt3、acd16-3g8和campath-1h(对照组)进行培养，并刺激人pbmc中nk细胞(cd3-cd16+cd56+)的增殖，通过对细胞成分分析来比较抗体组的功能。材料人静脉血，基础培养基x-vivo15(lonza，04-418q)，扩增培养基(x-vivo15，il-21000iu/ml)，人血清(genimi，100-512)。细胞培养和检测方法分离pbmc细胞，用基础培养基调整细胞密度到1e6/ml。加入试验组或对照组抗体、il-2(1000iu/ml)、人血清(5％)。在37℃、5％co2培养72小时。加入等体积的扩增培养基，继续培养48小时。之后每隔48小时取样计数，用扩增培养基稀释细胞至，继续培养。培养至第14天收获细胞，用荧光抗体percpmouseanti-human-cd3(bdbiosciences。1640培养基能够促进细胞的快速生长。

    相对便宜，失败率低，但易造成营养成分的流失。高压**某些培养基（如MEM）可进行高压**，例如清大天一的MEM培养基中的MD605、MD609等。其中不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠，可在高压**后加入。另外可高压的谷氨酸盐（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）可代替L-谷氨酰胺为保证高压**的效果，**设备的验证很关键，可高压**的培养基在121℃、15psi，15分钟的条件下完全可达到**效果及营养成分的**小损失，因此不需将**时间延长。**大多数培养基采用～μm孔径的微孔滤膜进行过滤**，并且已成为培养基**的发展方向，它可低限度地减少培养基的营养损失。细胞培养液的储存条件一般为2－8℃、密闭、避光保存，但要注意如下几点：1）过滤后的完全培养液，即添加了血清、谷氨酰胺、***等的培养液要尽快使用，一般在2－3周内使用完。培养液中的L-谷氨酰胺是不稳定的，不同温度L－谷氨酰胺的降解。2）**后的未加L-谷氨酰胺等添加剂的培养基溶液，一般可在4℃保存6～9个月，也可冷冻保存，用时解冻3）高压**后的培养基应置4℃保存，不能因为其可耐受高温而忽略储存温度。4）添加某些生长因子、***等添加物，可能会改变培养液的储存条件。DMEM高糖培养基是肿瘤细胞研究的理想选择。山西F12细胞培养基代理商

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    平衡盐溶液（balancedsaltsolution，BSS）简称盐溶液，集缓冲液的缓冲能力、生理盐水的等渗性以及培养液的营养供应特点于一体，兼具维持渗透压、缓冲和调节溶液的酸碱度、同时供给细胞生存所必需的能量和无机离子成分的作用。各种BSS的缓冲系统有所不同，其中以Hank’s液和Earle’s液为例，它们主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Earle’s(g/L)中比在Hank’s(g/L)中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡，以维持溶液的pH值。Eagles液在空气水平的CO2中，溶液会变碱，Hank’s液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存**，需要用Earle’s液，。如果**是清洗将要在细胞培养基中储存的**，用Hank’s液就可以了。表3-1几种常用的平衡盐溶液配方（g/L）一些BSS含有的Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成分，同时参与许多重要的细胞功能活动。但它们有使细胞凝集的作用，在配制分散细胞的消化液和特殊用途的细胞洗涤时，宜采用Ca2+、Mg2+含量较低的Dulbecco液或无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液，或者PBS液。概述基础细胞培养基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。中国澳门细胞培养基大概价格多少