新疆无血清培养基进口

    将未发生霉变的带有胚的一半种子用于愈伤**诱导实验；b、**消毒：于无菌环境下，将挑选的种子置于无菌三角瓶中，用无菌水清洗3-5次，75％酒精摇动清洗5min，无菌水清洗3-5次，5％naclo浸泡30min(期间每隔5-10min摇动30s)，清水洗3-5次，种子表面的无菌水可用干燥的无菌滤纸吸去。(2)配制诱导培养基：cs基本培养基+，用超纯水溶解，。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。(3)愈伤**的诱导方法：用弯头镊子将无菌种子的缺口一端倾斜插入cs水稻成熟胚愈伤**诱导培养基，胚贴于培养基表面；于温度24-26℃、湿度50-70％、光照强度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)cs诱导培养基的诱导结果为：水稻成熟胚愈伤**诱导时，经cs诱导培养基诱导培养12-14d产生大量淡黄色结构致密的团状愈伤**，出愈率为100％。如图7所示。对比培养例7：将cs基本培养基替换为ms基本培养基，其余完全同培养实例7，ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为：水稻成熟胚愈伤**诱导时，经ms诱导培养基诱导培养12-14d产生大量淡黄色结构致密的团状愈伤**，出愈率为100％。如图7所示。无血清培养基确保了细胞的纯净生长。新疆无血清培养基进口

    文献2“混合硝酸稀土对谷氨酸产生菌的影响，氨基酸杂志”发现，在发酵培养基中添加一定量的稀土元素，能够提高谷氨酸的产量。申请人之前的**技术“一种谷氨酸发酵培养基制备方法”，在常规培养基的基础上进行了改进，通过添加菌体蛋白浸膏来替代酵母膏氮源，不但节约了成本，还能提高氨基酸发酵产率，一举两得。技术实现要素：在已有发酵培养基的基础上，申请人针对微生物发酵的特点，继续进行了改进，以提高发酵效率，据此，提出了一种优化的谷氨酸发酵培养基。本发明是通过如下技术方案来实现的：一种优化的谷氨酸发酵培养基，其包括发酵培养基a和发酵培养基b；所述发酵培养基a首先添加，然后间隔12h以上添加发酵培养基b。进一步地，所述发酵培养基a的制备方法为：取各原料：葡萄糖，酵母浸膏，k2hpo4，mgso4·7h2o，2-羟基乙胺，cecl3，mnso4·h2o，feso4·7h2o，vb1，生物素；将各原料搅拌均匀后，调节ph，**，制得发酵培养基a。进一步地，所述发酵培养基b的制备方法为：取各原料：琥珀酸，尿素，壳聚糖；将各原料搅拌均匀后，调节ph，**，制得发酵培养基b。推荐地，所述发酵培养基a的制备方法为：取各原料：葡萄糖50-100g/l，酵母浸膏10-30g/l，k2hpo41-5g/l。中国香港减血清培养基产品介绍减血清培养基在减少实验误差方面表现出色。

    3)拟南芥叶片愈伤**的诱导方法：用手术剪刀剪开长势良好的无菌叶片，用镊子将其取出摆放在步骤(1)的诱导培养基中，使伤口接触培养基；于温度23-25℃、湿度50-70％、光照强度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)拟南芥根愈伤**的诱导方法：用镊子取出无菌苗的根，用手术剪刀剪开后平铺于步骤(2)的诱导培养基中，培养条件同步骤(3)。(5)cs诱导培养基的诱导结果为：拟南芥叶片愈伤**诱导时，培养6-8d在切口处出现颗粒状愈伤**，培养24-26d获得嫩绿色致密的团块状愈伤**，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％；拟南芥根愈伤**诱导时，培养5-7d在切口处开始出现少量颗粒状愈伤**，培养20-22d获得较大体积的淡黄色松脆型愈伤**，且在愈伤**周围观察到大量致密分布的白毛，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％。如图5所示。对比培养例5：将cs基本培养基替换为ms基本培养基，其余完全同培养实例5，ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为：拟南芥叶片愈伤**诱导时，培养7-10d在切口处出现颗粒状愈伤**，培养24-26d获得嫩绿色致密的团块状愈伤**，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％。

    才能满足新细胞合成、细胞代谢等生化反应所需要的物质和能量。细胞培养基的主要成份是水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助营养物质等。此外，还可能含有血清、血清替代成分、pH指示剂等。水是细胞的主要成份，也是细胞赖以生存的主要环境。细胞培养液中90%以上的成份是水。细胞对水的品质非常敏感，水的品质将直接影响细胞培养的效果。而水中通常含有重金属、氯、磷、有机物、热原等污染物，细胞培养用水须经过纯化，品质应符合***典注射用水标准或者超纯水的标准。能源和碳源是用于维持细胞生命和支持细胞生长，主要包括糖、糖酵解的产物和谷氨酰胺，其他氨基酸是次要的能源和碳源物质。细胞能够利用的糖类主要是六碳糖，目前大多体外培养时选取葡萄糖作为细胞的主要碳源和能量来源，因此细胞培养基中基本都含有葡萄糖，含量一般为5～25mmol/L。在葡萄糖浓度较高时，细胞主要通过扩散作用吸收葡萄糖，细胞膜内外的葡萄糖浓度梯度是细胞吸收葡萄糖的动力；在葡萄糖浓度较低时，主要由钠离子推动的高亲和性转运过程使细胞摄取葡萄糖。葡萄糖进入细胞后参与糖酵解、核酸代谢、糖原合成、能量代谢以及一些氨基酸的合成。与体内的能量供应途径不同。RPMI1640培养基含有多种关键营养成分，支持细胞生长。

    K+主要分布在细胞内液，细胞内K+对于***某些酶是必需的，并在调节细胞内环境的酸碱平衡上也有极重要意义。Ca2+在细胞外液中的作用是将**内部细胞之间相互粘着，在细胞内参与许多重要的细胞生理活动，如传导、参与肌肉细胞收缩等。在悬浮培养时，为了减少细胞的聚集和附着，要减少Ca2+的浓度。Mg2+是构成细胞间质的重要成分，对于细胞间相互稳定结合有很重要的意义。磷的化合物对细胞物质代谢和生理功能调控有重要作用。其他成分：肽、核苷、嘌呤等。可帮助细胞的克隆化培养及维持某些特殊细胞系的生长。分类低血清细胞培养基概述营养丰富的培养基是维持细胞活性及高密度生长的基础，营养缺乏容易引起细胞凋亡，新生牛血清中所含大部分营养成分可以通过化学成分明确的营养物质如氨基酸维生素等成分组合取代。低血清培养基营养成分大优于基础培养基，*需添加1％～5％新生牛血清，而对细胞生长、增殖、形态、活性和功能没有影响甚至有所改善。在国外低血清培养基早已有之，如Gibco等。但是他们的低血清培养基是在基础培养基中选择性的加入重组胰岛素（recombinantinsulin）、人源转铁蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些还包含一些生长因子。减血清培养基减少了血清对细胞的影响。云南Ham's F12培养基哪家便宜

无酚红培养基适用于对酚红敏感的实验设置。新疆无血清培养基进口

    三)、试验结果：初代培养：使用本发明的消毒方法，消毒成功率能达到80％，诱导培养基萌芽率能达到90％，可以成功建立无菌再生体系。继代培养：使用本发明的增殖培养基，绣球组培苗增殖倍率能够达到8～10倍，组培苗高度一致，生长健壮。生根培养：使用本发明的生根培养基，绣球组培苗生根率能够达到95％，根系发达，健壮，可以成功用于移栽大棚。本发明所指ms培养基是murashige和skoog研制的培养基，其成分配方表见表1。1/2ms培养基是指大量元素含量为ms培养基的一半，其他成分用量相同。表1、ms培养基成分表本发明涉及的植物生长调节剂有：6-ba—6-苄氨基嘌呤；ga3—赤霉素；iba—吲哚丁酸，naa—萘乙酸。本发明中的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均为液体培养基。本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例，并非依此限制本发明的保护范围，故：凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围之内。新疆无血清培养基进口