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Buffer组份浓度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将pH值调节至,然后加入去离子水将溶液定容至1L。4.高温高压**后,室温保存。注意:上述Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸铵组份浓度:10M醋酸铵配制量:100ml配制方法:1.称量g醋酸铵置于100~200ml烧杯中,加入约30ml的去离子水搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。3.使用mm滤膜过滤**。4.密封瓶口于室温保存。注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法:1.使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。2.操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。吉林缓冲液报价
pbs缓冲液的配制配方是10X的PBS母液,然后再对其母液进行1:10稀释即可获得PBS缓冲液。PBS是磷酸盐缓冲液(PhosphateBufferSaline),是生物学实验室**常用的缓冲液之一。其主要成分包括:氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)和磷酸二氢钾(KH2PO4)。配制步骤:清洗干净所需烧杯、转子和量筒,向一个烧杯装少量去离子水(约100ml)并放入一个转子后放在称量天平旁备用;向另一个烧杯装约800ml去离子水并在微波炉或者水浴锅(65°以上均可)中加热。注意:由于实验室所购买的Na2HPO4常常带有二水、七水或者十二水,与之对应的重量分别为1.78g、2.68g、3.58g。向烧杯中加入预热的去离子水,烧杯放置在磁力搅拌器上搅拌溶解。用量筒定容到1L,保存备用。取100ml10X的PBS母液,加入900ml去离子水即可获得pH=7.4的PBS缓冲液(无需用pH计校准PH值)。湖南无酚红缓冲液常用知识长时间或过量使用PBS缓冲液可能会对人体产生耐受性,导致恶心、呕吐、腹泻等症状。
实验室使用缓冲液时的pH计或酸度计调校方法:1、在对缓冲液使用pH计进行校正时,需要调整仪器的斜率,并将电极上部的橡胶塞拨开,将小孔暴露在外。否则,在校正过程中会产生负压,导致溶液无法正常进行离子交换,从而使测量数据不准确。2、将电极从烧杯中取出,用滤纸将未干的水分吸干,然后将其放入装有混合磷酸盆的烧杯中,等待大约15分钟,然后进行仪器的调整,设定基准点。3、然后将电极放入装有KHC8H4O4或硼砂溶液的容器中,等待15分钟后,观察仪器显示的pH数值。4、校正完成后,将橡胶塞放回原位。如果暂时不使用pH计,一定要保护好它,将其放入保护套中,以延长其寿命。此外,需要注意的是pH计属于易碎品,需要轻拿轻放。
手持式缓冲液pH计的校准方法:在温度为25度的条件下,将测试电极插入pH值为6.86的混合磷酸盐标准缓冲液中,并缓慢转动电极。可以稍微调整校正电位器,直到显示器上的数值与标准缓冲溶液的pH值相同。如果将电极插入其他缓冲溶液中,如pH值为4.01的C8H5KO4或pH为9.18的硼砂标准缓冲溶液中,显示的数值与缓冲液的pH值允许有一定误差,但误差应在参考值范围内。
缓冲液的作用和使用注意事项
一、缓冲液的概念缓冲液(Buffersolution)通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液,能够在加入一定量其他物质时减缓pH的改变。以生物实验中**常用的一种缓冲液PBS为例,是由Na2HPO4、KH2PO4组成的缓冲对,在PH5.8-8.0范围内有较强的缓冲能力。二、缓冲液的作用缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值,使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。例如,苯酚在碱性介质及铁**钾存在下,可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料,为了防止芳香胺类的干扰以pH在10士0.2时**为适宜。为此,就需要在待测溶液中加入氨一氯化钱缓冲溶液调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。 缓冲液能够提供酶所需的适pH值,这对于酶的活性至关重要。
从中选取包被抗体浓度和酶标抗体的稀释度。为了进一步节省试剂,可以此浓度为基点,缩小间距再进一步做棋盘滴定。?2测定方法的标准化?2.1加样?????ELISA中除了包被外,一般需进行96孔加样。定性测定中有时不强调加样量的准确性。例如规定为加样1滴,如不具备相当的条件,要尽量使用相同口径的滴管,保持准确的加样姿势,使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中,加样量应力求准确,**好采用量程准确的微量移液器。加样时应将液体加在孔底,不要加在孔壁上部,避免出现气泡。?2.2保温?????在ELISA中,一般在加标本和结合物后,反应的温度和时间应按规定的要求,保温容器**好是水浴箱,可使温度迅速平衡。各ELISA板不应叠在一起。为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。如用保温箱,空湿盒应预先放在其,以平衡温度。?2.3洗涤?????洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却是决定实验成败的关键。在标本和结合物的稀释液和洗涤液中加入聚山梨酯一类物质即避免非特异性吸附,在ELISA中**为常用。ELISA板的洗涤一般可采用以下方法:吸干孑L内反应液;将洗涤液注满板孔;发表评论请自觉遵守互联网相关的政策法规,严禁发布***、**、反动的言论。此外,PBS缓冲液也可能会对皮肤产生一定的刺激性,长期使用可能会导致皮肤老化和干燥。海南EBSS缓冲液价格对比
缓冲液(Buffer solution)通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液。吉林缓冲液报价
ph值测定常用的标准缓冲溶液有哪几种
ph值测定常用的标准缓冲溶液草酸盐标准缓冲溶液酒石酸盐标准缓冲溶液苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液磷酸盐标准缓冲溶液硼酸盐标准缓冲溶液氢氧化钙标准缓冲溶液在一定程度上能抵抗外加少量酸、碱或稀释,而保持溶液pH值基本不变的作用称为缓冲作用。具有缓冲作用的溶液称为缓冲溶液。缓冲溶液性质a.抗酸/碱,抗稀释作用因为缓冲溶液中具有抗酸成分和抗碱成分,所以加入少量强酸或强碱,其pH值基本上是不变的。稀释缓冲溶液时,酸和碱的浓度比值不改变,适当稀释不影响其pH值。b.缓冲容量缓冲容量是衡量缓冲溶液缓冲能力大小的尺度。缓冲容量的大小与缓冲组分浓度和缓冲组分的比值有关。缓冲组分浓度越大,缓冲容量越大;缓冲组分比值为1时,缓冲容量比较大。 吉林缓冲液报价
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