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1:50~l:800)后,按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照),保温,洗涤。加工作浓度酶标抗体,洗涤,加底物显色,加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值;为0.8左右,阴性参考血清A值<0.1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg/L、lmg/L、/L三个浓度按行包被,每一个浓度包被三行(每行3孔),分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原,弱阳性抗原和阴性对照,将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度,分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色,加酸终止反应,分别读取A值。以强阳性抗原液A值在,阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1.1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择:①用IgG进行包被,洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。③加酸终止反应后,读取吸光度(A)。读取A值在1.0时的酶标抗体稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。在进行pH计校准时,首先需要选择合适的pH缓冲溶液。中国澳门PBS缓冲液代理商
1MTris-HCl(,,)组份浓度:1MTris-HCl配制量:1L配制方法:1.称量gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。4.将溶液定容至1L。5.高温高压**后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低。10&timeTEBuffer(,,)组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。3.将溶液定容至1L后,高温高压**。4.室温保存。MTris-HCl()组份浓度:MTris-HCl配制量:1L配制方法:1.称量gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.用浓盐酸调节pH值至。4.将溶液定容至1L。5.高温高压**后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低。3M醋酸钠()组份浓度:3M醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至3.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压**后,室温保存。中国澳门PBS缓冲液代理商缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化.
PBS 与 DPBSPBS 和 DPBS 都包括氯化钠和磷酸盐缓冲液,是生物学研究中常用的试剂,用于维持 pH 值,同时可大幅度地减少活细胞中的渗透压休克;然而,与 PBS 相比,DPBS 还包括氯化钾,配方中可含或不含钙和镁以及含或不含葡萄糖和**酸。根据您的具体应用选择 PBS 或 DPBS。
Dulbecco 的磷酸盐缓冲液(DPBS)DPBS 与 PBS 的不同之处在于它还包括氯化钾,并且提供多种配方。它也用于生物应用,水基缓冲液,包括氯化钠和磷酸盐缓冲液。
HBSS 与 EBSSHanks 的平衡盐溶液(HBSS)和 Earle 的平衡盐溶液(EBSS)都是等渗溶液,用于维持生物应用中的渗透压和 pH 值。虽然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氢钠,用于短期维持生长培养基以外的细胞,但 EBSS 在 5% CO2 下使用,而 HBSS 包含较少的碳酸氢钠,可以在没有 CO2 的情况下使用。从各种依应用而定的配方中进行选择。
如何计算缓冲溶液的有效PH范围电离平衡常数的负对数加减1之间。即pK±1之间。例如以醋酸/醋酸盐为共轭酸碱对的缓冲溶液的有效缓冲范围是:PKa±1=±1之间。即。缓冲溶液是无机化学及分析化学中的重要概念,缓冲溶液是指具有能够维持PH相对稳定性能的溶液。pH值在一定的范围内不因稀释或外加少量的酸或碱而发生***的变化,缓冲溶液依据共轭酸碱对及其物质的量不同而具有不同的pH值和缓冲容量。扩展资料:缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定,但酸和盐的比例不同时,就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时,溶液的pH值与PKa值相同。酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不变。酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为比较高,比例相差越大,缓冲效率越低,缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。在络合滴定和分光光度法等许多反应里都要求溶液的pH值保持在一个范围内,以保证指示剂的变色和显色剂的显色等,这些条件都是通过加入一定量的缓冲溶液达到的,所以缓冲溶液是分析测试中经常需要的一种试剂。采用电位滴定法测定外加酸或碱对不同配比同一种缓冲溶液的滴定曲线。 如果加入的酸或碱量过多,缓冲溶液的缓冲能力会降低,pH值会发生变化。
2.配制方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)混合均匀后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS组份浓度:10%(W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水,68℃加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至3.将溶液定容至100ml后,室温保存。2NNaOH组份浓度:2NNaOH配制量:100ml配制方法:1.量取80ml去离子水置于100~200ml塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。2.称取8gNaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。3.待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100ml。4.将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。NHCl组份浓度:NHCl配制量:100ml配制方法:1.在ml的去离子水中加入ml的浓盐酸(N),均匀混合。2.室温保存。5MNaCl组份浓度:5MNaCl配制量:1L配制方法:1.称取gNaCl置于1L烧杯中,加入约800ml的去离子水后搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。3.高温高压**后,4℃保存。20%(W/V)Glucose组份浓度:20%(W/V)Glucose配制量:100ml配制方法:1.称取20gGlucose置于100~200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水后,搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。缓冲液能够提供酶所需的适pH值,这对于酶的活性至关重要。广东DPBS缓冲液代理商
缓冲溶液在医学检验中有着重要的意义。中国澳门PBS缓冲液代理商
PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液,一般选择Na2HPO4和KH2PO4配制,因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液,称量不同质量的磷酸盐,也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。
配置方法播报编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步骤进行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 将18.2%(体积分数)KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合; 中国澳门PBS缓冲液代理商
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