药品体外评价方法

斑马鱼和哺乳动物的心脏有相似的功能，包括血流方向、由专门的心内膜肌肉组织驱动的高压系统、由电子系统调节的心律以及与起搏活动相关的心跳。斑马鱼对典型的心脏的药理学反应与人类相似。斑马鱼受精后48h，心血管系统功能全，呈现出例子通道和代谢过程的复杂性。因此，可以应用斑马鱼评价药物对心衰的防治作用。维拉帕米是苯烷胺类钙离子拮抗剂,其诱导心力衰竭的药理学基础有以下三方面:（1）对心脏的抑制作用,即负性频率、负性传导及负性肌力作用,且为剂量依赖性;（2）扩张血管作用,即对外周血管具有明显的扩张作用,使外周阻力降低,平均动脉压下降;（3）减少冠脉血流,降低心肌血供。我们用维拉帕米建立斑马鱼心衰模型。患有心衰的斑马鱼与正常斑马鱼比较，出现心包水肿、静脉瘀血、心搏出量减少和血流速度减慢，由于斑马鱼通体透明的特点，可以明显被观察到。斑马鱼模型评价胃肠道毒***品体外评价方法

我们先将测试斑马鱼喂食蛋黄粉和荧光标记的胆固醇（蛋黄粉和荧光标记的胆固醇通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内），建立血脂高模型后，再将受测试斑马鱼分成两组，分别是模型对照组和服用降脂剂组，服用降脂组摄入阿托伐他汀钙、辛伐他汀、洛伐他汀之类的降脂剂。服用一段时间降脂剂后，我们对斑马鱼整体做脂肪特异性染色，观察体内甘油三酯聚积的变化，以及观察体内胆固醇的聚积情况，同时利用甘油三酯和胆固醇试剂盒检测斑马鱼体内甘油三酯和胆固醇含量的变化。皮肤抑菌试验利用斑马鱼模型评价促进生长发育功效。

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用心肌保护剂组。其中正常对照组未经任何处理，模型对照组与服用心肌保护剂组都摄入了等量的盐酸异丙肾上腺素（盐酸异丙肾上腺素通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用心肌损伤保护剂组在摄入盐酸异丙肾上腺素的同时摄入N-乙酰半胱氨酸之类的心肌保护剂。服用一段时间心肌保护剂后，我们对斑马鱼整体进行特异性荧光染色，观察心肌细胞的凋亡情况。可以看到，服用心肌保护剂组的心脏情况与正常对照组比较相似，细胞凋亡明显比模型对照组减少。

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用肝保护剂组。其中正常对照组未摄入乙醇，模型对照组与服用肝保护剂组都摄入了等量的乙醇（乙醇通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。肝保护剂组在摄入对乙醇的同时摄入美他多辛之类的肝保护剂。服用一段时间肝保护剂后，我们在显微镜下观察斑马鱼肝脏及卵黄囊表型，同时制作成病理切片观察肝脏的病理结构变化。从病理切片中也能看出来，正常对照组肝细胞核规则清晰，肝细胞结构正常，边缘清晰。乙醇处理后，斑马鱼肝细胞结构模糊、肝细胞核肿大，肝组织出现脂肪空泡样变性，而肝保护剂组细胞和正常斑马鱼中形态相似。利用斑马鱼模型评价肠道消化功能。

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和肾保护剂组。其中正常对照组未摄入马兜铃酸，模型对照组和肾保护剂组都摄入了等量的马兜铃酸（马兜铃酸通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。肾保护剂组在摄入马兜铃酸的同时摄入山牡荆水提取物之类的肾保护剂。检测肾小球滤过率的斑马鱼在实验过程中需额外静脉注射荧光物质。服用一段时间肾保护剂后，1.统计斑马鱼肾性水肿的发生率，2.用荧光显微镜拍照，通过斑马鱼全身荧光强度分析肾小球滤过率。斑马鱼模型评价听毒性。生药的安全性评价

利用斑马鱼模型评价糖尿病神经炎症消退功效。药品体外评价方法

随着电子产品的大量使用，用眼的时间和强度已远超过去，用眼过度引起一系列视力问题。研究表明，高度近视、视网膜疾病、白内障、眼干燥关节综合征均与眼细胞凋亡相关。斑马鱼的眼部血管结构跟人非常相似，斑马鱼视网膜结构也跟人高度相似。用霉酚酸吗啉乙酯可以诱发斑马鱼眼细胞凋亡，模拟人的眼部疾病。用特异性荧光染色（呈绿色），患有眼疾的斑马鱼眼细胞凋亡较正常斑马鱼明显增多，在荧光显微镜下可以观察到。经过每组30尾斑马鱼的对比实验，眼保护剂组斑马鱼眼细胞与正常对照组相似，并未出现模型对照组的大面积细胞凋亡情况。药品体外评价方法

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