甘肃DMEM细胞培养基

    细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方。RPMI RPMI 1640 培养基相比其他培养基之所以具有独特的效果，是因为其中含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。甘肃DMEM细胞培养基

    其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上，DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍。MEM（MinimalEssentialMedium）培养基MEM（MinimalEssentialMedium）培养基有含Earle's平衡盐的类型，也有含Hanks'平衡盐的类型；有高压灭菌型的，也有过滤除菌型的；还有含非必需氨基酸的类型。是基本、适用范围广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好，常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基础上改良，增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交瘤细胞培养，以及无血清培养的基础细胞培养基。RPMI-1640细胞培养基专门针对淋巴细胞培养设计，含有BSS、21种氨基酸、维生素等，适于多种正常细胞和肿瘤细胞的培养，也用做悬浮细胞培养。HamF12细胞培养基含微量元素。贵州医疗细胞培养基全国发货DMEM/F12培养基常作为开发无血清培养基的基础，也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。

RPMI-1640细胞培养基RPMI-1640是Moore等人开发出来的，RPMI是该研究所开发的一类细胞培养基，1640是培养基代号。

RPMI-1640是改进型的McCoy‘s5A培养基，使用碳酸氢盐缓冲系统，与大多数哺乳动物细胞培养基不同的是其典型的PH8的配方。

RPMI-1640培养基常初是为淋巴细胞培养专门设计的，现在已广泛应用于各种正常细胞和ai细胞的培养，包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞和ai细胞，是使用常为广的培养基之一。

RPMIRPMI1640培养基相比其他培养基之所以具有独特的效果，是因为其中含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。RPMI1640培养基含有生物素、维生素B12以及PABA，这些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具备的。针对广的细胞培养应用，我们提供多种组分的RPMI1640改良培养基。

    Ham’sF-12K培养基是Ham’sF-12营养混合物的Kaighn’s改进型，在Ham’sF-12的基础上提高了氨基酸和**酸的浓度，降低了葡萄糖的用量，并修改了盐的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培养基**初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞。针对***的细胞培养应用，我们提供多种组分的Ham’sF-12K改良培养基。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂，用以持续监测培养液的酸碱度，在低PH值时酚红使培养液呈黄色，而较高的PH值时使培养液呈紫色，PH值～，**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点，研究表明酚红可以模拟固醇类***（特别是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的细胞时（如乳腺组织），比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外，一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”，是体外培养中为预防微生物污染**常用的***，其中，青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，对革兰阳性菌特别有效；而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合，抑制细菌蛋白质的合成，对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效，但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。 针对细胞培养应用，我们提供多种组分的MCDB改良培养基。

    Dulbecco’s改良培养基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培养基的基础上研制的，与MEM培养基相比，氨基酸的含量增加了2倍，维生素的含量增加了4倍，同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。DMEM培养基**初设计葡萄糖含量为1000mg/L（低糖型），后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L（高糖型），现已广泛应用于各种细胞的培养。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产，例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。不含葡萄糖的培养基可以根据研究需要，随意调节葡萄糖的浓度，方便快捷。L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养元素，但其在溶液中不稳定，会自发降解，不含L-谷氨酰胺的培养基，可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量，在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。 Ham’s F-12与DMEM等体积混合后，得到的DMEM/F12培养基营养更为丰富，使用更为广。河南DMEM细胞培养基全国发货

Ham’s F-12营养混合物（Ham’s F-12 Nutrient Mixture）是由Ham以Ham’s F-10营养混合物为基础设计而成的。甘肃DMEM细胞培养基

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养素，但其在溶液中不稳定，会自发降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨对细胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定，不会自发的降解。细胞利用其机制是：在细胞培养时，细胞会逐渐向培养液中释放一种肽酶，将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后细胞会将这两种水解产物吸收利用。细胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养策略相似，连续的将低浓度水平的L-谷氨酰胺加入到培养液中，从而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不会生成多余的氨，更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺，适用于所有的细胞，几乎无需适应，并且可以延长细胞的培养时间，减少传代次数，即节省了时间也节约了金钱。与添加L-谷氨酰胺的培养基中培养的细胞相比，活性降低得更慢。延滞期略微延长的原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间。NEAA（非必须氨基酸），是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（门）冬酰胺、L-天（门）冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA，能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用，有效促进细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需要。甘肃DMEM细胞培养基

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