江西转染试剂怎么样

时间:2021年01月04日 来源:

.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。

2.高灵活应用, 同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。


3.细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。


4.兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。


图4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程,或标准实验方法,将100nM HPRT特异性siRNA转染至4种细胞,通过LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。 连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理。江西转染试剂怎么样

将胶质瘤干细胞(3×105)接种至6孔板中,然后使用riboFECT CP转染试剂分别将5μl 20μM BMPER、CXCL10和HOXA9 siRNA转染进胶质瘤干细胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和western blots检测siRNA***效率。结果发现DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为53.21%、47.46%和46.31%。将1.25μl TREM-1 siRNA(20μm)和3μl riboFECTTM CP Regent在30μl riboFECTTM CP Buffer中混合以产生转染混合物。然后将混合物加入DMEM(siRNA浓度:50nM)中,与原代小胶质细胞培养48 h。RT-PCR和western blot分析检测转染效率。结果发现转染TREM-1 siRNA后******了OGD诱导的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上调。黑龙江转染试剂价格3.0试剂进行转染的每个个体间所检测的生物标志物的水平与未注射该试剂的个体相比并没有***差异。

胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要!!当然也要保证细胞状态特别好,没有细微污染,铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦!

载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统,当然使用三质粒系统的小伙伴居多,一定要选择成熟商业化的载体系统!载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失,或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯:建议目的基因载体和阴性对照GFP 载体是同一批,且建议每次包装都如此操作,要保证目的基因的表达载体构建纯化良好,质粒间比例得当,并且对质粒进行酶切验证.

用于哺乳动物细胞基因***的传统RNAi方法通常使用由两个未经修饰的21-mer寡核苷酸退火形成的合成RNA双链生成短/小干扰RNA (siRNA)。Thermo Fisher Silencer Select siRNA和Stealth RNAi siRNA采用**的化学修饰改善传统双链,能获得更好的RNAi结果。

采用siRNA转染试剂可以将siRNA轻松导入细胞内。siRNA分子进入细胞后参与合成了RNA诱导沉默复合物(RISC)。在siRNA反义链的引导下,RISC可以降解目的mRNA,***其翻译,然后通过分析检测RNAi活性。一般会同时设置对照,对RNAi结果进行比较。RNAi的成功取决于正确导入合适量的siRNA,达到比较大预期反应。siRNA脱靶效应会导致细胞死亡,并引起分析问题。研究人员一直致力于寻找更好的siRNA转染试剂。 无论有无血清、***存在均可获得很高的转染效率。

确定希望输送的运载物

(如DNA、RNA或蛋白质)

根据不同实验类型,我们可能需要将不同的运载物输送到细胞内部,包括**常见的DNA,用于基因编辑的siRNA,能够更快表达蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是体内转染。正确的了解您希望输送的运载物是选择可靠转染产品的第一步。


No.2

希望转染的细胞类型

转染的细胞类型可简单分为两大类,连续细胞系和原代细胞。



连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理。但由于此类细胞经历过基因改变而变得具有无限增殖能力,它们在培养过程中的表现可能无法必然地反映体内状态。 连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理.快速转染试剂用血清和培养基的区别

各种转染试剂成分分析.江西转染试剂怎么样

超级好用的siRNA和miRNA转染试剂——HiPerFect


高效沉默低脱靶:HiPerFect是小RNA**转染试剂,这种非脂质体的脂质分子可以在siRNA低至100 pM浓度的条件下转染(推荐浓度是1 nM-5 nM)。保持高效基因沉默的同时降低脱靶效应,正是这一产品的精髓所在。除了siRNA,HiPerFect还能够用于miRNA模拟物和***剂的转染,满足miRNA功能分析的需要。


操作简单,方便快速:HiperFect转染试剂的方便程度也是***的,甚至***之内可以完成再次接种、转染到检测结果!这对于高通量反应简直是求之不得的福音:转染前将细胞按比例接种到24孔培养皿中,培养基可以是含有***和血清的,在37度培养箱中保温。 江西转染试剂怎么样

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