吉林转染试剂用血清和培养基的区别

时间:2021年01月14日 来源:

罗氏X-TremeGENE 便是新一代转染试剂的佼佼者,升级版的多组分混合试剂,兼具极高转染效率和极低细胞毒性,在超过350株真核细胞株中获得了高效转染的验证,尤其针对难转染细胞株亦有出色表现。

图1. 两种试剂对CHO-K1 细胞转染带GFP标记的质粒,A和C是转染后荧光显微图,B和D是明场显微图. 与竞争产品比较,X-tremeGENE HP表现出更优的转染效率更低的细胞毒性

图2. 不同试剂在含血清的培养基中对四种很难转染的细胞株进行转染,X-tremeGENE HP 试剂远优于其他试剂


超过350种细胞株的高效转染验证


还有一个好消息

X-TremeGENE转染试剂

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默克自2015年成为罗氏生化试剂的全球***代理,可以提供从细胞培养和功能分析、基因机理研究到蛋白机理研究的完整方案:


原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖.吉林转染试剂用血清和培养基的区别

LNCap 细胞的培养和传代严格由 ATCC 建议的操作步骤进行,与 pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和 pEGFP-N3(1:1,共 1.0 微克)共转染(6 孔板中每孔的量),并用 LipoD293™ 试剂(左图)和 Fugene HD(右图)分别按照生产制造商的科学实验步骤进行转染。转染 24 小时后,用尼康 Eclipse 2000 荧光显微镜检测 GFP 荧光,以此来评价转染效率。在血清和***的存在下,HepG2 和 SaoS-2 细胞用 pEGFP-N3 和 pSV-β-半乳糖苷酶 DNAs 分别转染达到 95% 的细胞融合。转染 48 小时后,分别通过 Zeiss 510 激光共聚焦显微镜和 β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测效率。hela转染试剂比例注意事项CycloFect转染试剂,你了解多少?

产品特点

难转染细胞的**选择产生高滴度的***对长 DN**段同样有效(**长可达 180 kb)对悬浮 293 细胞同样有效(例如 293F, 293 H 等)产生高 水平的重组蛋白血清和抗体不影响转染效率对单 DNA 和多 DN**段的共转染特别有效物美价廉存条件

40 ℃ 储存。若储藏合适,产品的稳定性能保持 12 个月以上。

与市场品牌产品转染效率比较

对 HepG2 细胞转染效率的比较

左图:血清和***存在的条件下能提高 LipoD293 试剂(升级版)对在 HepG2 细胞的转染效率。通过三种不同的条件下转染 HepG2 细胞(生长在胶原处理的培养皿上)---无血清和***,10% 血清和***的存在,转染 5 小时后换液和不换液。

对 CHO 细胞转染效率的比较


图3. 用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。


高效、靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果


图4. 使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。 .0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。

产生慢***的比较

通过 LipoD293™ 试剂(升级版)和 Lipofectamine LTX(LTX)试剂将三个 cDNAs 共转染进 293T 细胞。一个 GFP 载体,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用来测定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 细胞,其次是分别添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上图)和 10 微升(下图)。

5 天后,细胞通过流式细胞仪检测。右上角的数字表明转导的细胞的百分比来测定慢***的滴度。由 LipoD293™ and LTX 产生的慢***的滴度被量化,分为是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。黑龙江怎么配制转染试剂

连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理。吉林转染试剂用血清和培养基的区别

用LipoFectMax™转染Hela细胞,左图转染GFP cDNA,右图共转染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。

4适用于神经细胞的转染图4.  用LipoFectMax™ 和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白(GFP),转染24小时后观察转染效果,LipoFectMax™ 转染效率(左图)比LipoFectamine®2000(右图)高5倍。

LipoFectMax™ 转染试剂转染试剂操作流程


吉林转染试剂用血清和培养基的区别

细胞毒性低图2.LipoFectMax™ ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。
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