北京配制好的转染试剂

在选择转染方法时，需考虑您希望输送的运载物（DNA、RNA或蛋白质）以及您希望转染的细胞类型。您可通过下表选择各类阳离子脂质体转染试剂和Neon转染系统。

我们提供了各种DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA输送选择，让您可以对自己的结果更加自信.***的输送效果—可转染多种类型的细胞无毒性作用—您之所以能看到结果，是因为核酸存在，而不是因为试剂需要的优化工作更少—针对大多数细胞类型提供了快速、简便的实验方案

连续细胞系 具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理。但由于此类细胞经历过基因改变而变得具有无限增殖能力，它们在培养过程中的表现可能无法必然地反映体内状态。

.0试剂及RNAi复合物非常容易获得：只需简单地混合，并进行孵育（30min）、稀释、及注射即可。北京配制好的转染试剂

原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖,因此，它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系，它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后，原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命（即它们是有限细胞系），且随着传代的进行，具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位，从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说，这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便，尤其是稳定转染的克隆传代。加多少转染试剂的公司连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理.

细胞转染实验是生物医学实验室中**常规的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。

目前主要有三种主流方法：生物转染，物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用***等微生物作为基因导入载体，以慢***、腺***和腺相关***等**常见，其侵染效率可以达到90%以上，但常因安全性等问题，很多实验室对其敬而远之。

物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因***，无论哪一种都需要特定的设备，且一分钱一分货，性能好的价格也都很性感

电转化

化学转染方法是生物医学研究中**常用的转染方法，主要包括两类：阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。

胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！

载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP 载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证. 连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理。

产品特点

难转染细胞的**选择产生高滴度的***对长 DN**段同样有效（**长可达 180 kb）对悬浮 293 细胞同样有效（例如 293F, 293 H 等）产生高 水平的重组蛋白血清和抗体不影响转染效率对单 DNA 和多 DN**段的共转染特别有效物美价廉存条件

40 ℃ 储存。若储藏合适，产品的稳定性能保持 12 个月以上。

与市场品牌产品转染效率比较

对 HepG2 细胞转染效率的比较

左图：血清和***存在的条件下能提高 LipoD293 试剂（升级版）对在 HepG2 细胞的转染效率。通过三种不同的条件下转染 HepG2 细胞（生长在胶原处理的培养皿上）---无血清和***，10% 血清和***的存在，转染 5 小时后换液和不换液。

对 CHO 细胞转染效率的比较

一般会同时设置对照，对RNAi结果进行比较。RNAi的成功取决于正确导入合适量的siRNA，达到比较大预期反应。北京转染试剂残留检测

每孔培养体积均为100μL，细胞数目在105左右。北京配制好的转染试剂

用于哺乳动物细胞基因***的传统RNAi方法通常使用由两个未经修饰的21-mer寡核苷酸退火形成的合成RNA双链生成短/小干扰RNA (siRNA)。Thermo Fisher Silencer Select siRNA和Stealth RNAi siRNA采用**的化学修饰改善传统双链，能获得更好的RNAi结果。

采用siRNA转染试剂可以将siRNA轻松导入细胞内。siRNA分子进入细胞后参与合成了RNA诱导沉默复合物(RISC)。在siRNA反义链的引导下，RISC可以降解目的mRNA，***其翻译，然后通过分析检测RNAi活性。一般会同时设置对照，对RNAi结果进行比较。RNAi的成功取决于正确导入合适量的siRNA，达到比较大预期反应。siRNA脱靶效应会导致细胞死亡，并引起分析问题。研究人员一直致力于寻找更好的siRNA转染试剂。 北京配制好的转染试剂