北京cck8与mtt

再此，给大家分享个小事情，有次，因为实验时间点已经到，但是盒子不够，我们就用了某天的CCK-8试剂盒，***出来的结果如图3。这个结果是我所不能接受的。后来用Sigma的再重复了一次，如图4，这种有深有浅的才是该有的结果。我想说的是在有能力选择范围内，尽量选择好一点的试剂，免得浪费时间。

后来博士换了导师，换了课题，没有再用Sigma的了，用了一个日本的牌子，名字和货号如下，结果只能说just soso，肯定没有Sigma的好用。二次 CCK8细胞增值检测实验简介.北京cck8与mtt

在培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时，还应考虑***的吸收，可在加入***的培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度作为空白对照。

· 金属对CCK-8显色有影响：当终浓度为1 mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会***5%、15%、90%的显色反应，使灵敏度降级。如果终浓度是10 mM的话，将会*****。

· 悬浮细胞由于染色比较困难，一般需要增加细胞数量和延长培养时间。

· 加入CCK-8 时，如果细胞培养时间较长，培养基颜色或pH 值已变化，建议换用新鲜的培养基。

·  用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定，且要擦拭干净样品板了。 天津dojindo cck8使用方法微生物对细胞的毒性或增殖的实验。

CCK-8的用途1.细胞增殖测定：细胞增殖实验在很多领域都会用到，比如**相关、损伤后修复等。

2.***筛选：在测定一个***的毒性和安全有效浓度时，经常会用到CCK-8。

3.细胞毒性测定：这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响，比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。

4.**药敏试验：这个是用的比较广的，我见过做**的团队，买CCK-8都是一整箱，一整箱的买，比如果子老师所在的团队，哈哈哈。

5.微生物对细胞的毒性或增殖的实验。

4、读数前可在摇床上温柔混匀，酶标仪在 450nm 波长处检测每孔的吸光度。

***率（％）= [（对照孔吸光度-实验孔吸光度）/（对照孔吸光度-空白孔吸光度）]×100=IC50

注意事项

1、CCK8法检测细胞生长情况基于的原理是脱氢酶催化的反应，如果实验处理条件中存在还原剂的影响，应事先去除。如果实验条件中存在还原物质，需单独测定还原物质的空白吸光度。如果还原物质的吸光度很小，可以忽略不计；但如果吸光度很大，则需要去除培养基，再用培养基洗涤细胞3次，然后再加入新的 100ul培养基和10ul CCK-8 溶液进行检测。 与MTT相比，CCK-8和XTT的价格比较贵。

五、实验注意事项：

· 若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。

· 如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK8之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉***影响。当然***影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。 不同的种板数对检测***的IC50影响大吗？上海cck8细胞毒性实验设计

所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。北京cck8与mtt

CCK-8的原理

所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。为什么是粗略的呢，因为这里没有考虑到细胞代谢水平的高低，有些细胞在***处理后，可能活细胞数不变，但是代谢率低了以后，细胞呼吸减弱，NAD+产生减少，测出的Formazan也会减少，所以此时怎么算呢（此时我就比较怀恋中性红了）？当然也有解决的办法，下期给大家介绍。因此可利用这个原理进行细胞增殖和毒性分析，在吸光度为450时检测读数。颜色也会越深 北京cck8与mtt