浙江cck8细胞增殖实验od值

CCK-8的原理

所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。为什么是粗略的呢，因为这里没有考虑到细胞代谢水平的高低，有些细胞在***处理后，可能活细胞数不变，但是代谢率低了以后，细胞呼吸减弱，NAD+产生减少，测出的Formazan也会减少，所以此时怎么算呢（此时我就比较怀恋中性红了）？当然也有解决的办法，下期给大家介绍。因此可利用这个原理进行细胞增殖和毒性分析，在吸光度为450时检测读数。用途及常用的公 换液的意思是将cck8加在培养基中以换液的形式加在孔板中避免气泡产生。浙江cck8细胞增殖实验od值

酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰；

◆ 细胞毒性非常低，因此加入WST-8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到比较好测定时间。

实验二：细胞增殖-毒性检测

1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（37℃，5% CO2）。

2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。

3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。

4、向每孔加入10μL CCK溶液（注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。

5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

浙江cck8同仁MTT与CCK8区别是什么?

细胞增殖实验就是对细胞生长的测定，常用的方法有MTT、CCK8以及流式检测。阅读大量文献发现，如果想证明一个***或者说是一个作用条件对细胞生长的影响，基本上大家都采用MTT或CCK8结合流式的双标准来证明作用效果。所以，***先给大家介绍一下MTT和CCK8比色法的实验操作和注意事项。

MTT实验操作

1、在96孔板中培养细胞，设置对照组（细胞+无血清培养基）、实验组和空白组（无血清培养基），可以采用如下图的排版方式：

2、在对照组和实验组中，每孔加入细胞悬液100ul,培养24小时；

CCK8的优点：

方法方便，不用洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；

CCK-8快速检测；

CCK-8检测灵敏度高，细胞密度低也可以检测；

CCK-8的重复性优于MTT 法；

CCK-8对细胞的毒性很小；

CCK-8细胞活性检测试剂中是1瓶溶液，不需要现用现配，即开即用。

CCK8的缺点：

相比于与MTT法，CCK8的价格比较昂贵

生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

用途：***筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、**药敏试验。 微生物对细胞的毒性或增殖的实验。

经验总结及分享：

CCK8的说明书大家一定要认真阅读，里面很多细节的问题都有提到。而且说明书里提供的一些关于各种细胞的种板数都很有参考价值，因为那是反复验证过的比较好数值。但无论如何，做这个试验一定要摸条件。你就算再懒，这个懒不得，否则你都只是在做无用功。以下言论全部以细胞毒性试验为前提， 如果你做的是促进细胞生长的***的药效实验那就另当别论了。

用酶标仪测定在450nm处的吸光度。湖北cck8实验注意事项

无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低.浙江cck8细胞增殖实验od值

CCK8检测原理图

2操作步骤

1、在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（37℃,5%CO2）。

2、细胞处理（不同实验处理方式不同）。

3、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。

4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

5、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

6、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。

浙江cck8细胞增殖实验od值