江苏cck8试剂 室外

时间:2021年01月23日 来源:

制作标准曲线

1. 先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。

2. 按比例 ( 例如:1/2比例 ) 依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做 3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。

3. 接种后培养2-4 小时使细胞贴壁,然后加 CCK-8试剂培养一定时间后测定 O.D值,制作出一条以细胞数量为横坐标 (X轴) ,O.D值为纵坐标 (Y轴) 的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量 (使用此标准曲线的前提条件是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入 CCK-8后的培养时间)。 科研狗**值钱的就是时间,不能再被CCK8“拖累”了.江苏cck8试剂 室外

一、用途:

 ***筛选、

 细胞增殖测定、

 细胞毒性测定、

 **药敏试验等。


三、所需设备及仪器:


1. 10ul,100-200ul及多通道移液器

2. 酶标仪(带有450nm滤光片)

3. 96孔培养板

4. 二氧化碳培养箱



7、培养0.5-4小时:细胞种类不同,形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话,可以继续培养,以确认比较好条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少,需要较长的显色时间(5-6小时)。

8、测定450nm吸光度:建议采用双波长进行测定,检测波长450-490nm,参比波长600-650nm。



上海cck8标准曲线细胞增殖与毒性检测实验方法及经验总结-CCK-8 .

经验总结及分享:

       

CCK8的说明书大家一定要认真阅读,里面很多细节的问题都有提到。而且说明书里提供的一些关于各种细胞的种板数都很有参考价值,因为那是反复验证过的比较好数值。但无论如何,做这个试验一定要摸条件。你就算再懒,这个懒不得,否则你都只是在做无用功。以下言论全部以细胞毒性试验为前提, 如果你做的是促进细胞生长的***的药效实验那就另当别论了。


摸条件包括1、种板数;2、种板后细胞的贴壁生长时间;3、加药后的孵育时间;4、cck8试剂加入量;5、cck8试剂加入后细胞孵育时间。看起来很多,其实这就是一个实验。而且都是种的空白板,也就是不加***,只加细胞和CCK8。

培养基对CCK8测定的影响:不同的培养基中含有氧化还原性物质不同,(主要是氨基酸的成分及糖含量),会与CCK8发生反应,产生实验误差,因此所用培养基要一致,不要更换其他培养基。比如DMEM空白吸收为0.93;1640培养基在0.5左右。另外培养基中有酚红存在的情况下,会增加空白吸收,但不影响测定,扣除空白吸收即可,可见空白孔非常重要,所以每次实验均要设定空白对照。另外,血清不影响测定。有师妹在做一个HIF1a***剂实验时,多加了这个***剂的浓度,若细胞培养时间较长,培养基颜色或 pH 发生变化,建议更换培养基后再加 CCK-8.

1、种板数:这个要查文献,看你所用细胞别人有无做过,把范围大致找出。记住还要参考说明书,这个很重要。然后稀释一系列浓度种板。首先你要观察多长时间细胞可贴壁完全,一般贴壁生长24小时。然后还有在你的实验时间内,不同细胞数下孔内生长情况。比如我拟定考察4天的时间,那么在4天内,细胞是刚好铺满还是堆积生长?因为每块板都会设置对照孔,也就是含有细胞的培养基+CCK8,这个数值是板上的比较大数值,CCK8试验比较好OD值在1.0附近,所以这个比较大数值比较好能控制在1.0左右。我的实验经验是不要让细胞长满,一旦长满了很难去判断是否堆积生长了,对***能否顺利进入细胞有影响此为其一,其二生长不均匀易导致孔间OD值数据偏差大,而且OD值也很大。细胞增殖与毒性检测实验方法及经验总结-CCK-8 法.北京dojindo cck8

MTT与CCK8区别是什么?江苏cck8试剂 室外

在政策促进下,未来3—5年内,我国将在医药健康短缺地区建设一批高水平临床医治中心、高层次的人才 培养基地和高水平的科研创新与转化平台,培育一批品牌优势明显、跨区域提供高水平服务的集团。新增内容体现了我国医药产业技术升级的方向,有助于引导企业紧跟国际前沿技术,加快开发具有国际竞争力的新产品,提高产业化水平。既是细胞转染试剂,ecl发光液,cck8细胞增殖,内参抗体当前发展的重要方向,也是我国重视中医药传承与创新发展的重要体现。随着西方健康服务理念的进入及国内需求市场的飞速增长,国内以体检为重点的有限责任公司得到了飞速发展,尤其是近年来,健康服务机构飞速发展。尽管中国老年健康服务目前仍处于初始发展阶段,但近年来我国出台了一些扶持政策,市场空间逐渐打开。未来,新的从事生物技术、物联网技术、网络技术领域内的技术开发、技术咨询、技术转让、技术服务,软件开发,电子商务(不得从事增值电信、金融业务),化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)、实验窒设备的销售。工商合作模式很有可能将随着两票制许可人制度的变革而出现。此外,流通渠道多元化和扁平化,医药流通和零售也将受业外势力的冲击而改变营销模式。江苏cck8试剂 室外

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