上海优等胎牛血清保存

无血清细胞冻存液的操作规范：

  1、培养细胞至对数生长晚期，显微镜观察其外观、形态、有无污染等。选择状态良好的细胞进行冻存操作(注：贴壁生长细胞，用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化，进行细胞计数;悬浮生长细胞，进行细胞计数)。

  2、500～1000g离心5min，弃上清。

  3、 加入适量的细胞冻存液，重悬细胞，使细胞浓度达到1～10×106/ml，置于冻存管中密闭。

  4、采取逐级降温保存：4℃放置20min，-20℃放置30min，-70℃ 过夜，***置于液氮罐中长期存储。

  注意：

  务必超净工作台内无菌操作，避免污染。

  杂交瘤细胞冻存时应定期复苏，以检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。 新配方百白破混合制剂接种反应较低，血清学效果也较好。上海优等胎牛血清保存

马血清

产品介绍：

马血清采用成年健康马血液为原料加工而成，经无菌采集、分离、微孔过滤分装而成。马血清本产品无支原体、无噬菌体，低内***，**终过滤孔径0.1um。

特点：

·经三次100nm过滤。

·三种方法检测确保无支原体，细菌病毒检验符合美国USP和9CFR标准。

·内***含量≤10EU/ml，

·血红蛋白含量≤10mg/dl。

·促细胞生长因子含量高。

·马血清适用于原代传代细胞培养，兽用疫苗和诊断试剂生产。

·经济实惠，性价比高。

储存事项：

干冰运输，尽量避免反复冻融。

常期存放请将血清保存在-5℃至-2O℃冰箱中冻存,有效期5年。

重要提示：

产品用于：*供研究使用，不可用于人或动物的体外诊断与***。

重庆bi血清 厂家胎牛血清中含胎球蛋白 促细胞附着.

血清的鉴别方法

血清

血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆比较大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。血浆血浆是血液的液体成分，血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆，约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水（体积的90%），其中溶解的物质主要是血浆蛋白，还包括葡萄糖、无机盐离子以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞，同时也是运输分泌产物的主要媒介。

将新鲜血液离心，使血细胞沉降，上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。

抗体稀释参考

一抗稀释范围为1mg/mL原液1：1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL，二抗稀释范围为1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL

  注意事项  1.使用该产品比使用沉淀比色HRP底物检测所需的抗体浓度低。为优化抗体浓度,请进行一次系统的点印迹分析;

  2. 工作液在室温下8小时内可以保持稳定,但是应该避免暴露在阳光下或任何其他强光环境,然而短期实验室照明强度不会破坏工作液的稳定性;

  3. 封闭试剂有可能与抗体产生交叉反应,导致出现非特异性信号。封闭缓冲液同时也会影响系统的灵敏性,当从一种底物转换为另一种底物时,有时会出现信号衰减或背景增加的现象,原因可能是封闭缓冲液不适合新的检测系统;

  4. 使用亲和素/生物素检测系统时,避免使用牛奶作为封闭试剂,因为牛奶中含有不定量的内源性生物素,会导致高背景信号;

  5. 保证洗涤缓冲液、封闭缓冲液、抗体溶液和底物工作液的使用体积,以确保在整个实验过程中印迹膜完全被液体覆盖,避免膜变干。增大封闭缓冲液及洗涤缓冲液的使用量可以降低非特异性的信号;

收集悬浮细胞或贴壁细胞，离心去除上清液;

血清保存方法应保存在-5℃至-20℃。然而，若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

如何解冻血清才不会使产品质量受损？

将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

***:血清的成份可能有几百种之多，对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚，尤其是对其中一些多肽类生长因子、***和脂类等尚未充分认识，这给研究工作带来许多困难；

第二:血清都是批量生产，各批量之间差异很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保证每批血清的相似性极为困难，从而使实验的标准化和连续性受到限制；

第三:不能排除血清中含有易变物质，这被认为是“瓶中恶化”的原因之

血清能提供促接触和伸展因子，使细胞贴壁免受机械损伤，对培养中的细胞起到某些保护作用；重庆透析血清gibco

关于无血清细胞冻存液的操作规范是什么?上海优等胎牛血清保存

血清主要作用

●提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。

●提供和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质（氢化可的松）、类固醇（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。

●提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。

●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。

●对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢中起重要作用，如SeO3,硒等 上海优等胎牛血清保存