江苏cck8和mtt的比较

时间:2021年07月19日 来源:

培养基对CCK8测定的影响:不同的培养基中含有氧化还原性物质不同,(主要是氨基酸的成分及糖含量),会与CCK8发生反应,产生实验误差,因此所用培养基要一致,不要更换其他培养基。比如DMEM空白吸收为0.93;1640培养基在0.5左右。另外培养基中有酚红存在的情况下,会增加空白吸收,但不影响测定,扣除空白吸收即可,可见空白孔非常重要,所以每次实验均要设定空白对照。另外,血清不影响测定,所以我用CCK-8来测定病毒对细胞活性的影响或者某个***对病毒复制的影响时,我都小心翼翼的测很多个时间点,说实话,效果不是很好。所以我比较喜欢中性红。CCK8细胞增值检测实验简介.江苏cck8和mtt的比较

摸条件包括1、种板数;2、种板后细胞的贴壁生长时间;3、加药后的孵育时间;4、cck8试剂加入量;5、cck8试剂加入后细胞孵育时间。看起来很多,其实这就是一个实验。而且都是种的空白板,也就是不加药物,只加细胞和CCK8。我没有做过MTT实验,但其实原理及目的都是一样的(反应机理不一样)。都说CCK8简单点而且数据更稳定,所以就用了这个试剂盒。

当然仁者见仁智者见智,我写的只是个人实验心得,但供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的,道路是曲折的,时间就是用来浪费的,科研就是自娱自乐使劲折腾。


北京mts cck8化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).

。一般情况下,**外一圈的孔只加培养基,不作为测定孔用。在培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时,还应考虑***的吸收,可在加入***的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。金属对CCK-8显色有影响:当终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会***5%、15%、90%的显色反应,使灵敏度降级。如果终浓度是10 mM的话,将会*****。悬浮细胞由于染色比较困难,一般需要增加细胞数量和延长培养时间。

、***浓度的确定需要做一个时间梯度,铺板和上述相同,只需把各个实验组改成各个作用时间就可以了。至于说***浓度的确定,网上有很多确认方法,个人建议以IC50值作为***浓度即可。计算方法,某园子里都有,就不在这里介绍了。

MTT作用之后,一定要小心吸走培养液,以免将孔内的紫色结晶吸走。有条件的实验室,这一步可以采用离心机将沉淀充分离心到孔底,防止被吸出。如果没有这种类型的离心机,可以在测量吸光度的时候,将酶联免疫的机器震荡时间调制5分钟,**起码可以保证沉淀充分溶解。 **药敏试验:这个是用的比较广的,我见过做**的团队,买CCK-8都是一整箱,一整箱的买。

CCK8检测细胞增殖/毒性的注意事项:1.加入CCK8溶液时不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数;2.要设计空白对照组;3.对于大多数情况,加入CCK8溶液后,孵育2h左右就可以了;4.使用酶标仪之前要提前开启10min预热;5.若连续多天检测,必须保持所有条件一致。相关链接:CCK8的特性、保存方法以及与BrdU的区别CCK8空白对照,测定参比波长的设定以及OD值的合适范围CCK8标准曲线、检测时间、终止反应以及减少加样误差的方法外界因素(金属/***/细菌/培养基/培养板)对CCK8测定的影响细胞因素(预培养/生长方式/状态/细胞数/死细胞)对CCK8测定的影响细胞增殖到底用MTT还是CCK8呢?细胞增殖与毒性检测实验方法及经验总结-CCK-8 法.上海cck8测od值数据结果

与MTT相比,CCK-8和XTT的价格比较贵。江苏cck8和mtt的比较

细胞增殖实验就是对细胞生长的测定,常用的方法有MTT、CCK8以及流式检测。阅读大量文献发现,如果想证明一个***或者说是一个作用条件对细胞生长的影响,基本上大家都采用MTT或CCK8结合流式的双标准来证明作用效果。所以,***先给大家介绍一下MTT和CCK8比色法的实验操作和注意事项。MTT实验操作1、在96孔板中培养细胞,设置对照组(细胞+无血清培养基)、实验组和空白组(无血清培养基),可以采用如下图的排版方式:2、在对照组和实验组中,每孔加入细胞悬液100ul江苏cck8和mtt的比较

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