细胞增殖的方法

时间:2021年10月17日 来源:

上海儒安生物科技有限公司CCK8检测细胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓***二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazandye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。用途:***筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、**药敏试验CCK8的优点:使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;CCK-8法能快速检测;CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;CCK-8法的重复性优于MTT法;CCK-8法对细胞毒性小;CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。CCK8的缺点:与MTT法相比,CCK8和XTT的价格比较贵。CCK8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。与以往的增殖/毒性测定试剂相比较:检测方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢产物的水溶性差。细胞增殖涉及的内容有哪些呢?细胞增殖的方法

内参抗体

GAPDH-HRP Mouse mAb

产品简介

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase, GAPDH)是参与糖酵解的一种关键酶。其高水平组成性表达于几乎所有组织中,因此可作为Western Blot的内参对照。一些生理因素如缺氧、糖尿病等,会使GAPDH在某些类型的细胞中表达升高。

产品特点

▪用于WB实验,性价比高,推荐稀释比例为:1:1000 - 1:10000

▪常备现货

结果示例

GAPDH-HRP小鼠单抗经1:4000(泳道1) 和1:8000(泳道2)梯度稀释,

对小鼠肝脏裂解物进行Western Blot分析。 西安edu细胞增殖染色细胞增殖具体是指什么?

抗体稀释参考一抗稀释范围为1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL,二抗稀释范围为1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL注意事项 1.为获得比较好效果,在孵育步骤请使用摇床;  2.将Tween20(终浓度0.05-0.1%)加入封闭缓冲液和稀释的抗体溶液,以降低非特异信号;  3.不要使用叠氮钠作为缓冲液的防腐剂,叠氨钠是HRP的***物;  4.避免手与膜直接接触,实验过程应戴手套或使用干净的镊子;  5.所有设备必须清洁且不沾染外来物质,金属器械(如剪刀)不得具有可见的锈迹,锈迹可能导致斑点形成和高背景。

上海儒安生物科技有限公司转膜液

产品简介:

我们生产的Western转膜液(Western Transfer Buffer)可以用于Western时湿法电转膜,是一种快速效率高的特有配方转膜液,效果较好。

转印快速——室温转膜,20-30 分钟内将蛋白转移到印迹膜上。

转印效率高——产生热量非常小,减少蛋白损失。

配置灵活——配置1*转膜液时加入无水甲醇、无水乙醇均可,效果没有明显差异,兼容性好。

使用方法:

 1* 快速转膜液的配制(1000 ml):

 取100ml 此产品+800 ml 去离子水+100ml甲醇。

电转仪的设置:

一个转印槽:电压:110V,  电流:400mA;

二个转印槽:电压:140V,电流:700mA;

100kD 以下蛋白,胶浓度<10%的,转印时间20分钟即可转印完毕。

100kD 以上蛋白,胶浓度≥10%的,转印时间30分钟即可转印完毕。上海细胞增殖公司哪家强?

使用该产品比使用沉淀比色HRP底物检测所需的抗体浓度低。为优化抗体浓度,请进行一次系统的点印迹分析;

工作液在室温下8小时内可以保持稳定,但是应该避免暴露在阳光下或任何其他强光环境,然而短期实验室照明强度不会破坏工作液的稳定性;

封闭试剂有可能与抗体产生交叉反应,导致出现非特异性信号。封闭缓冲液同时也会影响系统的灵敏性,当从一种底物转换为另一种底物时,有时会出现信号衰减或背景增加的现象,原因可能是封闭缓冲液不适合新的检测系统;

使用亲和素/生物素检测系统时,避免使用牛奶作为封闭试剂,因为牛奶中含有不定量的内源性生物素,会导致高背景信号;

保证洗涤缓冲液、封闭缓冲液、抗体溶液和底物工作液的使用体积,以确保在整个实验过程中印迹膜完全被液体覆盖,避免膜变干。增大封闭缓冲液及洗涤缓冲液的使用量可以降低非特异性的信号; 细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。cck-8细胞增殖的方法

检测细胞增殖,你的方法用对了吗?细胞增殖的方法

总RNA提取试剂盒Trizol是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围较大,可以从动物单位、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。该方法对少量的单位(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的单位(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。样品在Trizol中被充分裂解的同时能够比较大限度地保证RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相,RNA分布在上清层中。收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,可用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、体外翻译等。Trizol试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7kb和15kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间(tRNA,5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。(注意如果是普通琼脂糖凝胶电泳,28S的位置大约在2kb,18S大约在1kb的位置,不同浓度的凝胶位置变化较大。)细胞增殖的方法

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