北京细胞增殖 cck8

时间:2021年11月01日 来源:

CCK8检测原理图2操作步骤1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(37℃,5%CO2)。2、细胞处理(不同实验处理方式不同)。3、向每孔加入10μLCCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。5、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。6、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。细胞增殖测定:细胞增殖实验在很多领域都会用到,比如**相关、损伤后修复等。北京细胞增殖 cck8

细菌***对CCK8检测的影响:我们做***的,经常会做到细菌或***对细胞的影响。那这种情况下我们应该怎么办。其实细菌防御系统还是非常强大,单独和CCK-8在一起孵育时,不会发生还原反应,几乎不会和细菌发生显色反应。而细菌不需要入胞繁殖,所以结果还是可信的。**讨厌的就是***,我不知道有多少人是做***的。***是需要入胞繁殖的,而且需要借助细胞的东西来进行繁殖。繁殖过程中就需要消耗宿主的能量,会产生氧化还原反应,所以我用CCK-8来测定***对细胞活性的影响或者某个***对***复制的影响时,我都小心翼翼的测很多个时间点,说实话,效果不是很好。所以我比较喜欢中性红。浙江cck8结果分析加入CCK8那会空白对照组的细胞刚好长满吗?

贴壁生长的时间我一般就直接让它贴壁长24h了,这个时间细胞已经贴壁完全,而且这样设置时间对自己安排实验时间也方便。没人愿意大半夜爬起来做实验吧。3、加药后的孵育时间,我的实验摸了3个时间,24h,48h,72h。然后根据数据的稳定性(RSD)、OD值的范围(1.0左右)这些来选择比较好的时间。太长了就没有必要了,细胞呆在孔里几天不换液结果可想而知了。4、CCK8试剂加入量,说明书中明确写出建议加入量为培养基体积的10%。这里有一个问题:假设我要孔内是200微升的体系,即细胞悬液+药液+CCK8=200微升呢,还是细胞悬液+药液=200微升,cck8不算在体系内呢。关于这一点文献报道不一致。本人**终采用的是后者。

细胞增殖-毒性检测1.在96孔板中配制100ml的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5%CO2的条件下)。2.向培养板加入10ml不同浓度的待测物质。3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6,12,24或48小时)。4.向每孔加入10mlCCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响O.D值的读数)。5.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。7.如果暂时不测定O.D值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10ml0.1MHCl溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基,去掉***的影响。当然***影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。MTT与CCK8区别是什么?

在做一些***毒性试验时,比如做铁死亡途径时,我们加入一个***叫C1,这个时候就需要提前换液,其实我们试过,还是会有一些影响。所以这时我们用中性红检测。我们实验室,通常会用20%的硫酸铜溶液放到细胞孵箱下层,预防******。理应说,硫酸铜分子在水溶液中是硫酸根离子和铜离子,是不会挥发的。但是每次只要是新换的硫酸铜溶液再做CCK-8,结果总是不好,我也不知道是什么原因。之前在我们实验室有发生过这样的事情,这种有深有浅的才是该有的结果。我想说的是在有能力选择范围内,尽量选择好一点的试剂,免得浪费时间。CCK-8的英文全称是Cell Counting Kit-8,也就是进行细胞计数的一个盒子。湖北碧云天cck8

无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低.北京细胞增殖 cck8

再此,给大家分享个小事情,有次,因为实验时间点已经到,但是盒子不够,我们就用了某天的CCK-8试剂盒,***出来的结果如图3。这个结果是我所不能接受的。后来用Sigma的再重复了一次,如图4,这种有深有浅的才是该有的结果。我想说的是在有能力选择范围内,尽量选择好一点的试剂,免得浪费时间。后来博士换了导师,换了课题,没有再用Sigma的了,用了一个日本的牌子,名字和货号如下,结果只能说justsoso,肯定没有Sigma的好用。二次北京细胞增殖 cck8

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