北京cck8检测凋亡

时间:2022年01月22日 来源:

CellCountingKit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazandye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰;北京cck8检测凋亡

CCK-8的用途1.细胞增殖测定:细胞增殖实验在很多领域都会用到,比如**相关、损伤后修复等。2.***筛选:在测定一个***的毒性和安全有效浓度时,经常会用到CCK-8。3.细胞毒性测定:这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响,比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。4.**药敏试验:这个是用的比较广的,我见过做**的团队,买CCK-8都是一整箱,一整箱的买,比如果子老师所在的团队,哈哈哈。5.微生物对细胞的毒性或增殖的实验江苏cck8结果细胞增殖检测——CCK8.

细胞增殖实验就是对细胞生长的测定,常用的方法有MTT、CCK8以及流式检测。阅读大量文献发现,如果想证明一个***或者说是一个作用条件对细胞生长的影响,基本上大家都采用MTT或CCK8结合流式的双标准来证明作用效果。所以,***先给大家介绍一下MTT和CCK8比色法的实验操作和注意事项。MTT实验操作1、在96孔板中培养细胞,设置对照组(细胞+无血清培养基)、实验组和空白组(无血清培养基),可以采用如下图的排版方式:2、在对照组和实验组中,每孔加入细胞悬液100ul

CCK8实验操作CCK8的优势在于对细胞没有毒性,可以直接加入细胞中长时间孵育,而不用考虑试剂本身对细胞带来的影响。1、向96孔板中每孔加入细胞100ul,置于培养箱中孵育24小时,96孔板的排版情况和上述MTT相同,在这里不重复介绍了。2、向各孔中加入10ul的CCK-8检测溶液。如若检测的细胞增殖或毒性试验,需在此之前加入作用***培养适当时间,例如6h/12h/24h等,然后再加入CCK8检测液。3、培养箱中孵育1~4小时,比较好反应时间以细胞具体显色程度为准。细胞增殖与毒性检测实验方法及经验总结-CCK-8 .

摸条件包括1、种板数;2、种板后细胞的贴壁生长时间;3、加药后的孵育时间;4、cck8试剂加入量;5、cck8试剂加入后细胞孵育时间。看起来很多,其实这就是一个实验。而且都是种的空白板,也就是不加药物,只加细胞和CCK8。我没有做过MTT实验,但其实原理及目的都是一样的(反应机理不一样)。都说CCK8简单点而且数据更稳定,所以就用了这个试剂盒。

当然仁者见仁智者见智,我写的只是个人实验心得,但供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的,道路是曲折的,时间就是用来浪费的,科研就是自娱自乐使劲折腾。


与MTT相比,CCK-8和XTT的价格比较贵。上海cck8注意事项

无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低.北京cck8检测凋亡

CCK8,即Cell Counting Kit-8,与MTT法的主要区别如下:一、原理不同1、Cell Counting Kit-8:CCK-8 试剂盒利用了日本同仁化学研究所(Dojindo)开发的四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)。2、MTT法:其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。北京cck8检测凋亡

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