天津cck8数据作图

时间:2022年01月24日 来源:

培养基对CCK8测定的影响:不同的培养基中含有氧化还原性物质不同,(主要是氨基酸的成分及糖含量),会与CCK8发生反应,产生实验误差,因此所用培养基要一致,不要更换其他培养基。比如DMEM空白吸收为0.93;1640培养基在0.5左右。另外培养基中有酚红存在的情况下,会增加空白吸收,但不影响测定,扣除空白吸收即可,可见空白孔非常重要,所以每次实验均要设定空白对照。另外,血清不影响测定,所以我用CCK-8来测定病毒对细胞活性的影响或者某个***对病毒复制的影响时,我都小心翼翼的测很多个时间点,说实话,效果不是很好。所以我比较喜欢中性红。使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂.天津cck8数据作图

酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。

· CCK8可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染,以免影响结果。

· CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年。

· 当在培养箱内培养时,培养板**外一圈的孔**容易干燥挥发,由于体积不准确而增加误差。一般情况下,**外一圈的孔加培养基或者PBS,不作为测定孔用。

· 在培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时,还应考虑***的吸收,可在加入***的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 江苏cck8 od值统计方法不同的种板数对检测***的IC50影响大吗?

。一般情况下,**外一圈的孔只加培养基,不作为测定孔用。在培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时,还应考虑***的吸收,可在加入***的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。金属对CCK-8显色有影响:当终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会***5%、15%、90%的显色反应,使灵敏度降级。如果终浓度是10 mM的话,将会*****。悬浮细胞由于染色比较困难,一般需要增加细胞数量和延长培养时间。

培养板对CCK8测定的影响:不同公司的培养板,以及培养板是否经过处理对读数都有一定的影响。所以前后实验要一致。另外在培养箱中,培养板**外一圈的孔容易干燥挥发,从而能导致培养基的体积不一样,增加误差。如果有可能,**外一圈的孔只加高压灭菌的PBS或ddH2O。另外,注意CCK-8不要贴在板壁上。一定要注意是否是***有问题。解决的方案就是可以在测定CCK-8的读数前,换个细胞液,再测定。这样会有一定的影响,但是影响的是所有的,所以均一性还算比较好。CCK8虽好,这些情况下不建议用!

细胞增殖实验就是对细胞生长的测定,常用的方法有MTT、CCK8以及流式检测。阅读大量文献发现,如果想证明一个***或者说是一个作用条件对细胞生长的影响,基本上大家都采用MTT或CCK8结合流式的双标准来证明作用效果。所以,***先给大家介绍一下MTT和CCK8比色法的实验操作和注意事项。MTT实验操作1、在96孔板中培养细胞,设置对照组(细胞+无血清培养基)、实验组和空白组(无血清培养基),可以采用如下图的排版方式:2、在对照组和实验组中,cck8试剂盒原理是什么a?天津cck8数据作图

无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低.天津cck8数据作图

五、实验注意事项:·若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。·如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉***影响。当然***影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。·当使用标准96孔板时,贴壁细胞的**小接种量至少为1,000个/孔(100μl培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μl培养基)。天津cck8数据作图

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