北京转染试剂加不加血清

时间:2021年05月21日 来源:

原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖,因此,它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系,它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后,原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命(即它们是有限细胞系),且随着传代的进行,具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位,从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说,这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便,尤其是稳定转染的克隆传代。质粒细胞转染步骤是什么?北京转染试剂加不加血清

对 HepG2 细胞转染效率的比较

右图:使用以上转染试剂将 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生产商的提供的转染步骤转染到 HepG2 细胞(在胶原预处理的培养皿中培养)。在转染 48 小时之后,用流式细胞仪检测 GFP 阳性细胞(%)和荧光强度。

左图:血清和***存在的条件下能提高 LipoD293 试剂(升级版)对在 HepG2 细胞的转染效率。通过三种不同的条件下转染 HepG2 细胞(生长在胶原处理的培养皿上)---无血清和***,10% 血清和***的存在,转染 5 小时后换液和不换液。

通用型无血清转染试剂如何使用一般会同时设置对照,对RNAi结果进行比较。RNAi的成功取决于正确导入合适量的siRNA,达到比较大预期反应。

胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要!!当然也要保证细胞状态特别好,没有细微污染,铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦!

载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统,当然使用三质粒系统的小伙伴居多,一定要选择成熟商业化的载体系统!载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失,或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯:建议目的基因载体和阴性对照GFP 载体是同一批,且建议每次包装都如此操作,要保证目的基因的表达载体构建纯化良好,质粒间比例得当,并且对质粒进行酶切验证.

罗氏X-TremeGENE便是新一代转染试剂的佼佼者,升级版的多组分混合试剂,兼具极高转染效率和极低细胞毒性,在超过350株真核细胞株中获得了高效转染的验证,尤其针对难转染细胞株亦有出色表现。图1.两种试剂对CHO-K1细胞转染带GFP标记的质粒,A和C是转染后荧光显微图,B和D是明场显微图.与竞争产品比较,X-tremeGENEHP表现出更优的转染效率更低的细胞毒性图2.不同试剂在含血清的培养基中对四种很难转染的细胞株进行转染,X-tremeGENEHP试剂远优于其他试剂超过350种细胞株的高效转染验证还有一个好消息X-TremeGENE转染试剂正在进行8折促销哦快去抢购吧~研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。

简介:X-tremeGENEHPDNA转染试剂是一种高效的无动物源成分的低毒转染试剂,兼容含血清或不含血清的培养基,可用于转染各类真核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。优势:1.简单易用的多组分混合试剂,无动物源性成分,室温稳定。2.高转染效率,对于原代细胞和使用其它试剂难转染的**细胞系有高转染效率。3.使用细胞毒性低的试剂,结果相关性好。图2.X-tremeGENEHP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENEHP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENEHP,导致存活细胞量减少(图片来源于网络)...mRNA细胞&***转染试剂来助力.安徽悬浮转染试剂

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细胞转染过程X-tremeGENE9DNA转染试剂简介:X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂,溶于80%乙醇中,经0.2μm滤膜过滤,然后封装于玻璃小瓶中,适用于细胞分析的多种实验。优势:1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高,生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间,只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释,再与质粒DNA共同孵育,即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化工作.北京转染试剂加不加血清

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