江苏cck8实验注意事项

时间:2021年05月24日 来源:

贴壁生长的时间我一般就直接让它贴壁长24h了,这个时间细胞已经贴壁完全,而且这样设置时间对自己安排实验时间也方便。没人愿意大半夜爬起来做实验吧。3、加药后的孵育时间,我的实验摸了3个时间,24h,48h,72h。然后根据数据的稳定性(RSD)、OD值的范围(1.0左右)这些来选择比较好的时间。太长了就没有必要了,细胞呆在孔里几天不换液结果可想而知了。4、CCK8试剂加入量,说明书中明确写出建议加入量为培养基体积的10%。这里有一个问题:假设我要孔内是200微升的体系,即细胞悬液+药液+CCK8=200微升呢,还是细胞悬液+药液=200微升,cck8不算在体系内呢。关于这一点文献报道不一致。本人**终采用的是后者。培养板周围一圈孔培养液容易挥发,为减少误差,建议培养板周围的四边每孔只加培养基。江苏cck8实验注意事项

细胞活性检测1.在96孔板中接种细胞悬液(100ml/孔)。将培养板放在培养箱预培养(在37℃,5%CO2的条件下)。2.向每孔加入10ml的CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响O.D值的读数)。3.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。4.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。5.如果暂时不测定O.D值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10ml0.1MHCl溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。细胞增殖-毒性检测1.在96孔板中配制100ml的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5%CO2的条件下)。湖北cck8 颜色深浅不同的种板数对检测***的IC50影响大吗?

统一铺好后,待细胞完全沉淀下来后,在显微镜下观察各实验组的细胞密度,如果密度不均匀,则固定一组,微调其他组细胞的量再次铺板(如:发现NC组细胞较多,降低细胞量再次铺板),放入细胞培养箱中培养。4.从铺板后第二天开始,每孔加入10-20μlCCK-8溶液,如果每孔的培养基为100μl,则加入10μlCCK-8溶液,如果每孔的培养基为200μl,则加入20μlCCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。

摸条件包括1、种板数;2、种板后细胞的贴壁生长时间;3、加药后的孵育时间;4、cck8试剂加入量;5、cck8试剂加入后细胞孵育时间。看起来很多,其实这就是一个实验。而且都是种的空白板,也就是不加药物,只加细胞和CCK8。我没有做过MTT实验,但其实原理及目的都是一样的(反应机理不一样)。都说CCK8简单点而且数据更稳定,所以就用了这个试剂盒。

当然仁者见仁智者见智,我写的只是个人实验心得,但供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的,道路是曲折的,时间就是用来浪费的,科研就是自娱自乐使劲折腾。


用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。

CCK-8的用途1.细胞增殖测定:细胞增殖实验在很多领域都会用到,比如**相关、损伤后修复等。2.***筛选:在测定一个***的毒性和安全有效浓度时,经常会用到CCK-8。3.细胞毒性测定:这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响,比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。4.**药敏试验:这个是用的比较广的,我见过做**的团队,买CCK-8都是一整箱,一整箱的买,比如果子老师所在的团队,哈哈哈。5.微生物对细胞的毒性或增殖的实验cck8试剂盒价格是多少?浙江贴壁细胞 cck8操作细节

MTT与CCK8比色法的实验细节和注意事项.江苏cck8实验注意事项

CCK-8的用途1.细胞增殖测定:细胞增殖实验在很多领域都会用到,比如**相关、损伤后修复等。

2.***筛选:在测定一个***的毒性和安全有效浓度时,经常会用到CCK-8。

3.细胞毒性测定:这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响,比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。

4.**药敏试验:这个是用的比较广的,我见过做**的团队,买CCK-8都是一整箱,一整箱的买,比如果子老师所在的团队,哈哈哈。

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