浙江cck8 换液后继续培养

时间:2022年02月10日 来源:

酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰;◆细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到比较好测定时间。实验二:细胞增殖-毒性检测1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5%CO2)。2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。4、向每孔加入10μLCCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。灵敏度高,数据可靠,重现性好.浙江cck8 换液后继续培养

一直都像个新手,从未老道过。所有新手的迷茫与无奈我**能体会。看到园子里有一些同学在问有关CCK8试验的事情,当初我也和他们一样,像个被蜘蛛丝缠住头的迷茫苍蝇一头扎进园子里,期待能找到些解决谜团的只言片语。希望我写的这些非专业文字能够帮助那些在实验室里没有前行者指点迷津的筒子们。当然仁者见仁智者见智,我写的只是个人实验心得,就供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的,道路是曲折的,时间就是用来浪费的,科研就是自娱自乐使劲折腾。上海cck8换液这个CCK-8的英文全称是Cell Counting Kit-8.

培养基对CCK8测定的影响:不同的培养基中含有氧化还原性物质不同,(主要是氨基酸的成分及糖含量),会与CCK8发生反应,产生实验误差,因此所用培养基要一致,不要更换其他培养基。比如DMEM空白吸收为0.93;1640培养基在0.5左右。另外培养基中有酚红存在的情况下,会增加空白吸收,但不影响测定,扣除空白吸收即可,可见空白孔非常重要,所以每次实验均要设定空白对照。另外,血清不影响测定,所以我用CCK-8来测定病毒对细胞活性的影响或者某个***对病毒复制的影响时,我都小心翼翼的测很多个时间点,说实话,效果不是很好。所以我比较喜欢中性红。

实验原理:CellCountingKit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazandye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8用途:***筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、**药敏试验.

CCK8检测细胞增殖和毒性实验佰欧晶生物专注于生命科学、医学及药学科研咨询和技术服务,致力于疾病关键基因功能研究,中药功能及机理研究,纳米靶向***研究,**研究整体方案服务。CellCountingKit-8(简称CCK-8)试剂用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazandye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。换液的意思是将cck8加在培养基中以换液的形式加在孔板中避免气泡产生。上海cck8增殖曲线

细胞增殖与毒性检测实验方法及经验总结-CCK-8 .浙江cck8 换液后继续培养

CCK-8的用途1.细胞增殖测定:细胞增殖实验在很多领域都会用到,比如**相关、损伤后修复等。

2.***筛选:在测定一个***的毒性和安全有效浓度时,经常会用到CCK-8。

3.细胞毒性测定:这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响,比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。

4.**药敏试验:这个是用的比较广的,我见过做**的团队,买CCK-8都是一整箱,一整箱的买,比如果子老师所在的团队,哈哈哈。

5.微生物对细胞的毒性或增殖的实验。 浙江cck8 换液后继续培养

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