湖北cck8 缺点

时间:2022年02月18日 来源:

统一铺好后,待细胞完全沉淀下来后,在显微镜下观察各实验组的细胞密度,如果密度不均匀,则固定一组,微调其他组细胞的量再次铺板(如:发现NC组细胞较多,降低细胞量再次铺板),放入细胞培养箱中培养。4.从铺板后第二天开始,每孔加入10-20μlCCK-8溶液,如果每孔的培养基为100μl,则加入10μlCCK-8溶液,如果每孔的培养基为200μl,则加入20μlCCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。湖北cck8 缺点

实验原理:CellCountingKit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazandye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。北京cck8结果怎么分析该方法已被***用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗*****筛选以及药敏试验等。

切记一定要使用无血清的基础培养基,一是可以排除血清对细胞生长的影响;二是血清的存在会对吸光度的测量产生影响。以上是MTT比色法的介绍,MTT比色法因为涉及到吸出培养基溶解沉淀的操作,所以更适用于贴壁细胞,悬浮细胞比较好选用CCK8检测细胞增殖,下面给大家介绍一下CCK8操作的注意事项。CCK8实验操作CCK8的优势在于对细胞没有毒性,可以直接加入细胞中长时间孵育,而不用考虑试剂本身对细胞带来的影响。向各孔中加入10ul的CCK-8检测溶液。如若检测的细胞增殖或毒性试验,需在此之前加入作用***培养适当时间,例如6h/12h/24h等,然后再加入CCK8检测液。

CCK-8的原理

所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。为什么是粗略的呢,因为这里没有考虑到细胞代谢水平的高低,有些细胞在***处理后,可能活细胞数不变,但是代谢率低了以后,细胞呼吸减弱,NAD+产生减少,测出的Formazan也会减少,所以此时怎么算呢(此时我就比较怀恋中性红了)?当然也有解决的办法,下期给大家介绍。因此可利用这个原理进行细胞增殖和毒性分析,在吸光度为450时检测读数。用途及常用的公 换液的意思是将cck8加在培养基中以换液的形式加在孔板中避免气泡产生。

CCK8检测细胞增殖/毒性的方法:

1.将处于对数生长期的各实验组细胞胰酶消化后,完全培养基重悬成细胞悬液,并计数。

2.根据细胞生长快慢决定铺板细胞密度(多数为1000-2000 cell/well),每组3-5重复,每孔100-200μl培养基。根据实验设计决定铺板数量(如需要检测5天,则铺5张96孔板),我们以1000 cell/well,5复孔,200μl培养基,检测5天为例,各实验组需要细胞数量为1000×5×5个细胞,从计数好的细胞悬液中取出所需的细胞量和完全培养基混匀,**终体积为200×5×5μl。 若细胞培养时间较长,培养基颜色或 pH 发生变化,建议更换培养基后再加 CCK-8.江苏cck8结果统计分析

那它的用途也就大致可以猜到,和细胞增殖、细胞毒性相关的实验都可以。湖北cck8 缺点

细胞增殖实验就是对细胞生长的测定,常用的方法有MTT、CCK8以及流式检测。阅读大量文献发现,如果想证明一个***或者说是一个作用条件对细胞生长的影响,基本上大家都采用MTT或CCK8结合流式的双标准来证明作用效果。所以,***先给大家介绍一下MTT和CCK8比色法的实验操作和注意事项。MTT实验操作1、在96孔板中培养细胞,设置对照组(细胞+无血清培养基)、实验组和空白组(无血清培养基),可以采用如下图的排版方式:2、在对照组和实验组中,每孔加入细胞悬液100ul湖北cck8 缺点

信息来源于互联网 本站不为信息真实性负责