上海roche转染试剂类型

时间:2022年03月04日 来源:

细胞转染实验是生物医学实验室中**常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用***等微生物作为基因导入载体,以慢***、腺***和腺相关***等**常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因***,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都很性感电转化化学转染方法是生物医学研究中**常用的转染方法,主要包括两类:阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。无论有无血清、***存在均可获得很高的转染效率。上海roche转染试剂类型

用 LipoD293™ 体外 DNA 转染试剂(Ver. II)(上图)和受欢迎的品牌产品 Invitrogen 公司的 293fectin™(下图)转染 pEGFP-C1 质粒到 HEK293 细胞中。转染 24 小时后,细胞的尼康 Eclipse 荧光显微镜 DIC 成像图(左侧)和荧光成像图(右侧)。

对悬浮 HEK293F 产生蛋白质效率的比较/

30 毫升的 293F 细胞分别使用 LipoD293™试剂、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将 pEGFP-6xHis 质粒导入细胞表达,用量为 LipoD293™ 试剂,20 微克,所有其他三种转染试剂均使用 30 微克质粒 DNA。 质粒转染试剂多少钱转染后6h观察细胞状态,并更换培养基,继续培养24 h后收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

用LipoFectMax™转染Hela细胞,左图转染GFP cDNA,右图共转染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。

4适用于神经细胞的转染图4.  用LipoFectMax™ 和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白(GFP),转染24小时后观察转染效果,LipoFectMax™ 转染效率(左图)比LipoFectamine®2000(右图)高5倍。

LipoFectMax™ 转染试剂转染试剂操作流程

细胞毒性低图2.LipoFectMax™ ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。

图3. 用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。



高效、靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果



图4. 使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。 细胞转染必备——高效低毒转染试剂.

在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。2.高灵活应用,同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。3.细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。4.兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。图4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程,或标准实验方法,将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞。通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。一般会同时设置对照,对RNAi结果进行比较。RNAi的成功取决于正确导入合适量的siRNA,达到比较大预期反应。质粒转染试剂哪种好

在经过***次传代培养之后,原代培养物变成了一种细胞系。上海roche转染试剂类型

Lipofectamine RNAiMAX转染试剂是先进、高效的siRNA输送解决方案。目前尚无其他siRNA转染试剂能够在***的细胞系中(包括常见细胞类型、干细胞、原代细胞以及历来难转染的细胞类型)提供如此简便、高效的siRNA输送效果。

高效

可在低siRNA浓度下获得优良的转染效果

相对于其他的siRNA转染试剂,Lipofectamine RNAiMAX 转染试剂可以获得更佳的基因***效果。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下,Lipofectamine RNAiMAX转染试剂实现了更高的有效***细胞/未转染细胞比率,超过其他RNAi试剂。 上海roche转染试剂类型

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