美国荧光多光子显微镜配置

时间:2021年10月10日 来源:

    基于多光子显微镜的神经成像技术原理:多光子显微镜可用于深度成像和三维成像,因此可用于拍摄不透明的厚样品。目前主要使用的多光子显微镜包括双光子显微镜和三光子显微镜。双光子显微镜的结构与共焦类似,区别在于:1)双光子显微镜的激发光波长比共焦长,能量较低,但穿透能力较强;2)双光子显微镜没有小孔,提高了检测效率;3)双光子显微镜成像深度较快提高。那么,为什么双光子能具有共焦显微镜所没有的优势呢?原因是它采用双光子激发方式。使用波长较长的激发光子,光子的能量较低,因此电子需要吸收两个这样的激发光子才能达到激发态,从而释放出一个荧光光子。因此,荧光信号的强度与光强的平方成正比。因为焦点处的光强较大,只能在焦点处激发荧光。波长越长,穿透力越强,因此双光子显微镜的成像深度大于共焦显微镜。由于两个光子只在焦点激发荧光,不需要小孔,而是将所有的荧光都收集起来,提高了检测效率。三光子显微镜的原理类似于双光子显微镜,利用三个激发光子可以实现更深的成像深度。由于使用了更长的激发波长,穿透能力更强,成像深度更大。此外,由于较强的非线性效应,荧光信号的强度与光强的立方成正比,因此比双光子具有更低的非聚焦激发和背景噪声。 多光子显微镜销售渠道分析及建议。美国荧光多光子显微镜配置

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    1,光源、光路高度整合通过精密的设计,将飞秒激光器、扫描振镜、PMT、滤光片组,甚至是单光子荧光光路全套整合在一个不大的扫描头(ScanHead)内,无论扫描头如何移动,扫描头内的光路都可以保持稳定不变,从而实现了超稳定、免维护的特点。2,配合多维度、高精度机械控制系统。扫描头直接架设在一个多维运动的机械装置上,可沿任意方向和角度移动扫描头,方便对动物样本进行多方位的扫描观察。而这在常规方案的多光子显微镜上有很大的实现难度,不但需要多个关节组合的光路导向机构,并且在这些关节旋转的时候,都冒着极大的光路偏移的风险,以至于在使用一段时间后都需要对光路进行再次校准,而这样的问题在我司上则完全不会发生。3.一机多能。 多光子显微镜数据分析全球多光子显微镜主要生产地区分析,包括产量、产值份额等。

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单光子激发荧光的过程,就是荧光分子吸收一个光子,从基态跃迁到激发态,跃迁以后,能量较大的激发态分子,通过内转换把部分能量转移给周围的分子,自己回到比较低电子激发态的比较低振动能级。处于比较低电子激发态的比较低振动能级的分子的平均寿命大约在 10s 左右。这时它不是通过内转换的方式来消耗能量,回到基态,而是通过发射出相应的光量子来释放能量,回到基态的各个不同的振动能级时,就发射荧光。因为在发射荧光以前已经有一部分能量被消耗,所以发射的荧光的能量要比吸收的能量小,也就是荧光的特征波长要比吸收的特征波长来的长。

    双光子显微镜工作原理是将超快的红外激光脉冲传输到样品中,在样品中与组织或荧光标记相互作用,这些组织或荧光标记发出用于创建图像的信号。双光子显微镜被多用于生物学研究,因为它能够产生高分辨率的3-D图像,深度达1毫米。然而,这些优点带来了有限的成像速度,因为微光条件需要逐点图像采集和重建的点检测器。为了加快成像速度,科学家之前开发了一种多焦点激光照明方法,该方法使用数字微镜设备(DMD),这是一种通常用于投影仪的低成本光扫描仪。此前人们认为这些DMD不能与超快激光一起工作。然而现在解决了这个问题,这使得DMD在超快激光应用中得以应用,这些应用包括光束整形、脉冲整形、快速扫描和双光子成像。DMD在样品内随机选择的位置上产生5到30点聚焦激光。 光子显微成像技术不是什么新技术,早在20多年前就有了,目前已经在生命科学和材料科学中广泛应用。

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要想实现离散的轴向重新聚焦,需要在OBJ1的焦平面中放置一个阶梯镜(图3b)。当入射激光束被OBJ1聚焦到的焦平面恰好与阶梯重合时,被反射的激光将在无穷大的空间中成为准直光束,并在OBJ2的焦平面上形成激光光斑。并且返回的激光束会被GSM消除横向扫描,即OBJ2形成的焦点不会进行横向扫描,实现轴向扫描。如果激光点被扫描到与焦平面不一致的阶梯,则会形成远离镜面的激光焦点,返回的激光束会在无穷大的空间中会聚或发散,进而导致由OBJ2形成的激光焦点也在轴向重新聚焦,通过这种方式即能实现离散的轴向扫描。对于已精确匹配两个物镜光瞳的光学装置,不会引入像差。为了进行连续的轴向重新聚焦,将阶梯镜替换为稍微倾斜的平面镜,同时入射的激光焦点也需要被倾斜,使得其以垂直于镜面的方向入射,通过相对入射激光束稍微平移OBJ1即可实现这种倾斜。多光子显微镜已经被生物学家普遍的运用于实验中。美国荧光多光子显微镜方案

多光子显微镜在临床前评价IA形态、细胞外基质、细胞密度和血管形成等方面显示出强大的作用。美国荧光多光子显微镜配置

光学成像技术与分子生物学技术的结合为研究上述科学问题提供了条件与可能。因此,在现代分子生物学技术基础上,急需发展新的成像技术。在动物体内,如何实现基因表达及蛋白质之间相五作用的实时在体成像监测是当前迫切需要解决的重大科学技术问题。这是也生物学、信息科学(光学)和基础临床医学等学科共同感兴趣的重大问题。对这-一一科学问题的研究不仅有助于阐明生命活动的基本规律、认识疾病的发展规律,而且对创新药物研究、药物疗效评价以及发展疾病早期诊断技术等产生重大影响。美国荧光多光子显微镜配置

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