揭阳ELISA试剂盒保质期

我们建议在临床ELISA试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，ELISA试剂盒很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，ELISA试剂盒在做HBsAg测定的室内质控中，ELISA试剂盒测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何?这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。ELISA试剂盒底物使用液必须新鲜配制。揭阳ELISA试剂盒保质期

ELISA试剂盒再加入酶标记的抗原或者抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或者定量分析。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类，如要做复孔，标本量收集体积＝ 100ul× 检测种类×2 。对于作某一个具体指标来说，较好先用一系列稀释度作一批标本测定，得出对实验有意义的一个稀释度（即测定剂量反应曲线），然后用一个较适稀释度测定即可。ELISA试剂盒收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在 4 ℃ 备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。云浮ELISA试剂盒保质期洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量完全一致，即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异，因此必须选择和订购长批号的试剂，并保证保存条件。严格执行这一标准可以避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂的复杂过程，并且能够保证结果的稳定性；对于效期短、使用率低的试剂，应当小量分装，每次使用则取分装部分即可，避免反复冻融造成试剂的失效。标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等，后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。

检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。试剂盒的标准曲线较高点OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.98。试剂盒重复性好，板内、板间变异系数均<9 %。试剂的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。检测抗体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。ELISA试剂盒测定的抗原通常为各种纯化抗原。

在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的较适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值较大而蛋白量较少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的。安徽ELISA试剂盒一般多少钱

ELISA试剂盒底物被酶催化成为有色产物。揭阳ELISA试剂盒保质期

ELISA试剂盒是较容易造假的试剂，因实验简单、一次性实验等特点而决定。常见的造假方法是：厂家用一种试剂盒如VEGF的盒子，贴上不同标签。如TGF,MIF等，就可以卖钱了，因为血浆，培养基等都含有VEGF,所以买家肯定能做出试验结果，发光液标准曲线也很好，待测品也会显色（没有清水），你根本不会怀疑，很Happy地去比色、计算、统计。这是商家常用的手段，很高明，一般人很难察觉。这比楼上说的标准品没做出来不知要高明多少，一般不会砸自己牌子。这类ELISA试剂盒，就是目录很长，能提供上百种甚至上千种试剂盒（目录册包装很烂），一打电话都说是国外分装，而且能较快供货，遇到这种情况你就要当心了。揭阳ELISA试剂盒保质期

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