土霉素素胶体金检测卡

时间:2022年10月30日 来源:

使用胶体金快速检测试剂盒检测含量相当于0、200、500、1000、2 000和5 000 μg/kg的呕吐素标准品结果如图1,随着呕吐素浓度增加,T线颜色变浅。对于含量大于或等于食品中呕吐素限量(1000 μg/kg)标准品T线颜色明显浅于C线,呈阳性;对于含量相当于5 000 μug/kg浓度的标准品T线依然有显色,说明该试剂盒检测呕吐素含量极限大于5000μgkg,能够满足市面检测要求。抗体能与目标物结构相似物质发生交叉反应,造成结果假阳性率高,使得胶体金测试卡特异性差。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。土霉素素胶体金检测卡

胶体金固相免疫测定法:(1)斑点免疫金银染色法(Dot-IGS/IGSS)是将斑点ELISA与免疫胶体金结合起来的一种方法。将蛋白质抗原直接点样在硝酸纤维膜上,与特异性抗体反应后,再滴加胶体金标记的第二抗体,结果在抗原抗体反应处发生金颗粒聚集,形成肉眼可见的红色斑点,此称为斑点免疫金染色法(Dot-IGS)。此反应可通过银显影液增强,即斑点金银染色法(Dot-IGS/IGSS)。(2)斑点金免疫渗滤测定法(dotimmuno-goldfiltrationassay,DIGFA)此法原理完全同斑点免疫金染色法,只是在硝酸纤维膜下垫有吸水性强的垫料,即为渗滤装置。在加抗原(抗体)后,迅速加抗体(抗原),再加金标记第二抗体,由于有渗滤装置,反应很快,在数分钟内即可显出颜色反应。此方法已成功地应用于人的免疫缺陷病病毒(HIV)的检查和人血清中甲胎蛋白的检测。福州有机磷胶体金检测卡农药残留快速检测技术在我国应用多的是酶抑制法。

免疫胶体金技术的使用优点是什么?(1)使用方便快速,便于基层使用和现场使用,所有反应能在15分钟内完成;(2)成本低,不需要特殊的仪器设备;(3)应用范围广,可适应多种检测条件;(4)可以进行多项检测,若阳性样本比较难获得,多项检测可以节省样品,降低成本;(5)标记物稳定,标记样品在4℃贮存两年年以上,无信号衰减现象;(6)胶体金本身为红色,不需要加入发色试剂,省却了酶标的致病性底物及终止液的步骤,对人体无毒害。胶体金检测仪利用胶体金检测卡检测,检测过程更加方便快捷,结果更加准确。

胶体金是氯金酸与还原剂(如柠檬酸钠)反应形成带负电的疏水胶体溶液,反应过程颜色变化是浅黄色-透明-黑紫色-紫红色,控制氯金酸与还原剂的比例可以得到不同粒径的胶体金溶液,具体比例大家可在网上参照相关数据,通过肉眼观察溶液颜色可粗略估计颗粒的大小。标记抗体原料选用40nm的粒径较多,抗原和小分子蛋白选用20nm较多,当然也可以使用更大粒径的颗粒,大颗粒灵敏度会相对好一些,不过特异性就很难保证了。胶体金标记是蛋白质结合到胶体金上的过程,金颗粒是一种特别娇贵且有洁癖的微球,标记过程使用的器皿一定要保证足够干净。胶体金在洁净的玻璃器皿中可较长时间保存,加入少许防腐剂可有利于保存。

胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、糖蛋白、酶、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。免疫金标记技术(Immunogoldlabellingtechnique)主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。食品安全现场快速检测,主要体现在定性检测和限量检测上。长沙疟疾胶体金检测卡

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