广州ELISA试剂盒厂家

时间:2022年11月29日 来源:

ELISA操作步骤杂乱,操作不当将引起较大的误差。加样、温育、洗涤、显色、比色。通常情况下,ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”来陈述成果,两者间有一条分界线被称为“阳性判断值”(cut-offvalue,CO值),这是定性免疫测定成果陈述的依据。ELISA手工检测进程杂乱,影响要素较多,即使室内质控在控,也可能因孔间差异而造成成果的差异,因而加大复查力度是确保成果准确性的牢靠办法,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及罕见模式的检测成果进行复查。ELISA试剂盒检测范围和灵敏度不同。广州ELISA试剂盒厂家

Elisa试剂盒固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。Elisa试剂盒使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。广州ELISA试剂盒厂家Elisa试剂盒避免用手接触,有毒。

不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量完全一致,即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异,因此必须选择和订购长批号的试剂,并保证保存条件。严格执行这一标准可以避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂的复杂过程,并且能够保证结果的稳定性;对于效期短、使用率低的试剂,应当小量分装,每次使用则取分装部分即可,避免反复冻融造成试剂的失效。标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素,前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等,后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。

ELISA试剂盒切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。在吸取液体时,要用量程和需要量接近的喷头去吸,减少误差。务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。ELISA是将抗原、抗体的免疫反应和酶的高效催化反应有机结合而发展起来的一种综合性技术。

良好的ELISA试剂盒板应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间、同一板各孔之间、同一板各孔之间性能相近。聚苯乙烯ELISA试剂盒板由于原料的不同和制作工艺的差别,各种产品的质量差异很大,因此,每一批号的ELISA试剂盒板在使用前须事先检查其性能。常用的检查方法为:以一定浓度的人IgG(一般为10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗涤后每孔内加入适当稀释度的酶标抗人IgG抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后,分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件,使各孔读数在吸光度0.8左右。计算全部读数的平均值。所有单个读数与全部读数的均数之差,应小于10%。ELISA检测试剂盒的反应往往灵敏。浙江ELISA试剂盒公司推荐

ELISA试剂盒的使用要严格按照说明书要求进行标准化操作。广州ELISA试剂盒厂家

ELISA试剂盒再加入酶标记的抗原或者抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或者定量分析。每个标本量收集体积=100ul×检测种类,如要做复孔,标本量收集体积= 100ul× 检测种类×2 。对于作某一个具体指标来说,较好先用一系列稀释度作一批标本测定,得出对实验有意义的一个稀释度(即测定剂量反应曲线),然后用一个较适稀释度测定即可。ELISA试剂盒收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在 4 ℃ 备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。广州ELISA试剂盒厂家

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