高性价比 血小板裂解液的组成

间充质间质细胞(MSCs)体外扩增的培养基一般添加胎牛血清FBS，但是考虑到异种ganran及免疫反应的风险，监管机构并不鼓励使用。人血小板裂解液除了不存在异种免疫反应或牛病原体ganran的风险，有助于增强间充质干细胞的扩增，也相对容易地根据良好的生产规范程序生产，并已用于临床应用，因此现如很多资料显示血小板裂解液已被证明是扩增MSCs一种非常有效的FBS替代方法（参考文献1）。 血小板裂解液由血浆组成，含有纤维蛋白原和凝血因子，对于一般细胞培养中涉及的含钙培养基来说通常需要加入抗凝剂（常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等）来防止凝胶形成，其中肝素很为常用。人源血小板裂解液是无动物源血清培养补充剂，能在细胞培养时提供细胞生长所需动力。高性价比 血小板裂解液的组成

MSCs在添加10% 血小板裂解液和不同浓度肝素的培养基中培养7天，随后使用MTT法评估增殖。脂肪组织源性间充质干细胞（AT-MSC）和骨髓源性间充质干细胞（BM-MSC）培养的过程中，如果使用的UFH浓度低于0.61 IU/mL或者使用Enoxaparin（LMWH）浓度低于0.024 mg/mL (2.4 IU/mL) 时培养液均呈现凝胶状态（灰色背景），而肝素浓度过高则对细胞增殖的负面影响明显且以剂量依赖的方式提高。备注肝素浓度单位换算：肝素浓度国际单位(IU)衡量，1IU国际单位是指在规定的条件下，将1ml全血延长凝血3分钟所需的量：1mg大约相当于100IU的肝素。高性价比 血小板裂解液价格多少GMP级血小板裂解液产品在严格的GMP条件下生产和分装。

    本课题在体外分离、培养和鉴定人牙髓干细胞、牙周膜干细胞及根尖牙rutou干细胞的基础上，通过比较体内、外不同培养模式下，血小板裂解液对这三种牙源性干细胞增殖及分化的影响，以期找到PL应用于牙源性干细胞培养、诱导分化的较好方式，为研究相关机制及组织工程应用提供实验基础，同时为将来PL在临床zhiliao方面的应用提供新的思路。结果如下。1.牙髓干细胞、根尖牙rutou干细胞和牙周膜干细胞的分离、培养和鉴定使用酶消化法或组织块法分离获得人原代DPSCs、SCAP和PDLSCs，利用有限稀释法克隆化培养以纯化传代细胞；采用免疫细胞染色及流式细胞仪鉴定细胞STRO-1等表型，确定所获细胞的间充质干细胞属性。采用成脂诱导及成骨/成牙本质诱导验证细胞的多向分化能力。2.血小板裂解液的制备及相关培养体系的建立使用10人份机**小板，混合后利用冻融裂解法制得满足实验需要的血小板裂解液PL；将PL制成品以一定的体积浓度比加入普通培养基及矿化诱导培养基配制成条件培养液；将扩增培养所获的牙源性干细胞以平面培养或复合HA-TCP支架培养，营造不同的细胞培养空间环境。

血小板在身体组织修复及伤口复原的过程中扮演着重要角色。血小板裂解物是由富含血小板的血浆纯化萃取而成，其中包含很多不同的细胞生长因子、细胞ji su和许多细胞增殖时所需的蛋白质。人源血小板裂解物是一种能有效支持间充质干细胞等人类细胞生长的高效细胞培养补充剂。不管是在科学研究或是临床zhi liao，血小板裂解物时常用来取代各类血清，例如胎牛血清、人类AB血清。Stemulate和nLiven成分完整、无分解、无耗损、无异源添加物，且不会在使用过程中产生凝血现象，故不需使用肝素或任何种类的抗凝血剂。Stemulate和nLiven包含所有能促进细胞生长的生长因子和蛋白，能在真正的无异源环境中使细胞量比较大化，表现比其他血清补充剂更为突出。 血小板裂解液不能反复冻融，否则容易产生沉淀。

    血小板裂解液（plateletlysate，PL）是自体或异体血小板富集物经细胞裂解后的产物，已经被诸多研究推荐作为胎牛血清（fetalbovineserum，FBS）的替代品，应用于间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSC）的大规模扩增培养。但是，PL对诸如牙髓干细胞（dentalpulpstemcells，DPSCs）、牙周膜干细胞（periodontalligamentstemcells，PDLSCs）及根尖牙rutou干细胞（stemcellsfromapicalpapilla，SCAP）等牙源性干细胞的生物学效应尚不明确。 血小板裂解液不能反复冻融。Helios血小板裂解液等级

人源血小板裂解液除了拥有比富血小板血浆更高的生长因子浓度。高性价比 血小板裂解液的组成

MSCs培养扩增的过程优化包含了很多关键变量，目的是为有效的MSCs生产筛选出一个稳健和可重复的扩增培养过程。同样用户必须考虑此过程对其总体生产成本的影响。Sexton的hPL解决方案减少了所需细胞数量的翻番时间，同时比较大限度地减少原材料的使用，比较终减少了细胞产品制造工艺的总成本。此外，生产材料的成分和结构的一致性不仅有利于细胞生产性能，而且是CGMP生产的一个明确目标。减少生产工艺涉及成分的种类不仅提高成功率,还减少失败的风险和随后的调查工作量。高性价比 血小板裂解液的组成

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