线性PEI转染试剂生产商

PEI在于可以应用于体内试验。当初试验经费很有限，被逼无奈只能放弃脂质体2000，选择PEI，以至于相当长的时间内，转染试验都不顺利。下面是几点关于PEI转染的注意要点：1.PEI的使用量可以参照脂质体2000的说明书，所用质粒尽量去内2.转染时，一定要把PEI+DMEM加入到质粒+DMEM中，顺序不可错，轻微混匀，静止20min3.转染后4小时，一定要换液！换含有FBS的完全培养液！因为PEI对细胞毒性太大4.如果后续试验涉及到稳定筛选，建议把血清浓度适当提高。PS：事实证明，PEI是可行的，已经做出稳定细胞系了。更多关于PEI转染试剂相关的信息，可咨询上海曼博生物医药科技有限公司！PEI转染试剂是一种高分子化学类转染试剂.线性PEI转染试剂生产商

稳定转染方法：1.接种细胞：转染前一晚，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比，每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同）。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题，欢迎咨询上海曼博生物！也欢迎关注我们的公众号：Mine-Bio进口PEI转染试剂优化要素用PEI转染时，一般和DNA的比例会是多少？

瞬时转染方法1.接种细胞：转染前一晚，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果：在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后5h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间更多关于PEI转染试剂相关的产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！

注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。近期还有PEIfree申请活动，欢迎咨询上海曼博生物！用PEI转染试剂为什么会出现沉淀？

上海曼博生物医药科技有限公司成立于2019年，依托于集团公司泉心泉意深厚的资源和超过400家国内客户群体，生命科学领域一站式供应链体系，以及高风险生物危险材料进出口平台的优势，曼博生物严格筛选国际创新且经过同行验证过的产品和技术，引入中国市场，开发、孵育和推广，致力于将全球创新产品和前沿技术带入中国，集中在为细胞/基因领域、/免疫，抗体药物研发客户提供小众创新产品，包括从Researchgrade到cGMP等级的无动物源培养基质，转染试剂、病毒转导试剂、基因编辑工具等产品和定制服务，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）药物研发从R&D到Clinicaltrial以及后期商业化的无缝转化。

上海曼博生物是Polysciences官方授权du jia代理商，更多关于转染试剂相关问题，欢迎咨询上海曼博生物！Polysciences 是一家化学品制造公司，产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年，起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案，帮助科学家揭示未知领域。 PEI转染试剂对复合物孵化的时间是有要求的，一般建议5~20分钟之间.线性PEI转染试剂生产商

哪个品牌的PEI转染试剂性价比较高？线性PEI转染试剂生产商

化学转染方法是生物医学研究中常用的转染方法，主要包括两类：阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。一方面使复合体整体带上正电荷（多数细胞膜表面带有弱的负电荷，通过电荷作用吸引复合体到细胞膜表面）；另一方面对线性的核酸进行浓缩，使其体积变小更易穿透细胞膜。阳离子聚合物类转染试剂可以说是贫穷实验室的福音了。早在2012年就有研究小组在大名鼎鼎的Nature Protocol上发表了PEI作为转染试剂的详细方法，到现在被越来越多的实验室采用。更多关于Polysciences PEI相关产品内容欢迎咨询上海曼博生物医药科技有限公司！也欢迎关注我们的公众号：Mine-Bio线性PEI转染试剂生产商