制备慢病毒转导实验宝典

时间:2024年04月20日 来源:

研究发现 LentiBOOST 和硫酸鱼精蛋白的组合使用可以产生比polybrene更高的转导效率,且对细胞活力或干细胞特性没有剂量依赖性的不良影响。这种转导增强剂的组合dai biao了一种有价值的临床兼容性polybrene替代方案,具有显著提高基因zhi liao应用中 MSCs 慢病毒转导效率的潜力。细胞状态对于慢病毒转导效率也具有很大的影响,良好的生长状态是达到高gan ran效率的保证,一般选择细胞形态较好、轮廓清晰、处于对数生长期的细胞进行gan ran可提高gan ran效率。更多关于LentiBOOST相关产品问题,欢迎咨询上海曼博生物!也欢迎关注我们的公众号查看更多技术文章:Mine-bio慢病毒转导增强剂是什么呢?制备慢病毒转导实验宝典

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人间充质干细胞 (MSCs) 的慢病毒转导可诱导长期转基因表达,并为多种基因zhi liao应用带来巨大希望。Polybrene是实验室研究中Zui常用的提高病毒基因转导效率的试剂,但它未被批准用于人体,并且还被证明会损害MSCs细胞的增殖和分化。因此,优化转导方案以应用于临床试验是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸鱼精蛋白是可替代的转导增强剂,可以按照现行的GMP标准生产,且很容易应用于现有的转导方案,并且曾被用于人类 CD34+ HSCs细胞的转导研究。聚凝胺(polybrene)是一种阳离子聚合物,1971年研究证明它可提高逆转录病毒的转导效率。polybrene的确切作用机制尚不清楚,多认为它是通过中和细胞表面与病毒粒子之间的负静电斥力,使病毒粒子容易吸附在细胞表面,从而促进病毒转导。更多技术文章欢迎关注公众号:Mine-bio浅谈慢病毒转导条件哪个牌子的慢病毒转导增强剂比较好呢?

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慢病毒是一种有包膜的RNA病毒,直径为80-120nm,呈二十面体对称结构、球形。病毒颗粒Zui外层是包膜(包膜蛋白决定了han ran细胞的类型),再往里依次为基质蛋白和衣壳,Zui里面是两条相同的正股RNA链和酶(逆转录酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒han ran的xian zhu特点是han ran个体在出现典型的临床症状之前,大多经历长达数年的潜伏期,之后缓慢发病,因此这些病原体被称为慢病毒。慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 来源的一种病毒载体,慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息,是慢病毒载体系统的主要组成部分。携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装成为有han ran力的病毒颗粒,通过han ran细胞或huo ti组织,实现外源基因在细胞或huo ti组织中表达。更多关于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒转导增强剂,欢迎咨询上海曼博生物!更多关于慢病毒转导的技术文章,欢迎关注上海曼博生物公众号:Mine-bio

产品介绍LentiBOOST是德国SirionBiotech开发的一种高效、无细胞毒性的慢病毒转导增强剂,用于临床前和临床的慢病毒载体转导。它是一种非离子型、非受体依赖性的表面活性剂,通过降低细胞膜粘稠度、提高脂质交换和跨膜转运,促进慢病毒与细胞膜的融合,提高转导效率。目前该产品在美国和欧洲已有30多个药物phaseIII/II/I临床实验中,并有相关药物已上市销售。产品特点l增强慢病毒转导效率,可高达90%—提高zhi liao蛋白表达量,有利于取得临床试验成功l减少MOI低至2倍,从而降低COGS(Costofgoodssold)——减少Lentivirus的用量和物料成本l控制单个细胞中的病毒载体拷贝数(VCN,VirusCopyNumber)——符合FDA/EMA对ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)产品的安全标准l易于使用——无需改变现有转导流程,兼容已经开发流程l提供研究级和GMP级——GMP级具有临床试验的所有必备文件l30多种应用LentiBOOST慢病毒转导增强剂的药物已在美国和欧洲进入临床试验(PhaseIII和PhaseI/II)阶段——加速了IND文件归档.

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产品特点1.增强慢病毒转导效率,可高达90%—提高zhi liao蛋白表达量,有利于取得临床试验成功2.减少MOI低至2倍,从而降低COGS(Costofgoodssold)——减少Lentivirus的用量和物料成本3.控制单个细胞中的病毒载体拷贝数(VCN,VirusCopyNumber)——符合FDA/EMA对ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)产品的安全标准4.易于使用——无需改变现有转导流程,兼容已经开发流程5.提供研究级和GMP级——GMP级具有临床试验的所有必备文件6.30多种应用LentiBOOST的药物已在美国和欧洲进入临床试验(PhaseIII和PhaseI/II)阶段——加速了IND文件归档。更多关于 慢病毒转导的相关产品问题,欢迎咨询上海曼博生物!也可了解由上海曼博生物代理的SIRION LentiBOOST慢病毒转导增强剂产品,更多技术文章欢迎关注公众号:Mine-bio什么增强慢病毒转导的效率?制备慢病毒转导实验宝典

慢病毒转导的特点是什么呢?制备慢病毒转导实验宝典

目前,CAR-T细胞主要通过病毒载体制备,大多数情况下由慢病毒或逆转录病毒做载体。慢病毒载体(LVs)由于其有效的将基因整合进靶细胞基因组,稳定的基因表达等特点,被认为是Zui有希望的基因zhi liao载体。与其他病毒载体相比,慢病毒载体的整合模式具有更低的致Ai风险,以及随机整合基因风险低,因此,用慢病毒载体生产CAR-T细胞更加安全有效,而且灵活。更重要的是慢病毒相较于其他病毒载体,生产成本相对较低。另外,慢病毒载体可以转导分化细胞,也可以转导分化细胞,因此,慢病毒载体可以转导更为guang fan的细胞,包括那些难转导的血液前体细胞,神经细胞,淋巴细胞和巨噬细胞。更多关于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒转导增强剂,欢迎咨询上海曼博生物!更多技术文章欢迎关注公众号:Mine-bio制备慢病毒转导实验宝典

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