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鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:三维胶原的制备 鼠尾胶原蛋白 型在浓度1mg/ml 以上, pH 左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度 1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,在成胶过程中需要加入 0.06体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。 需要的溶液 (均需要无菌、 预冷) 10mg/L 酚红用于pH 指示) 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一 般不用),双蒸水 200ul鼠尾胶原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到胶原溶液中, 会由于 NaOH 不能迅速混匀而产生局部的 胶原凝结) 立即混匀。再加入 100ul 10PBS 10培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后 pH 左右,如果PBS 或培养液中没有加 酚红,初次使用时需要用 pH 试纸测试)。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。鼠尾胶原对前庭毛细胞具有良好的贴壁黏附促进作用。开封鼠尾胶原单价
鼠尾胶原实验应用:鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。目的:建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果:自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性,免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论:成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法,并且制作简便,成本低廉。合肥鼠尾胶原厂家氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。
以鼠尾胶原为支架的类似物的建立:探寻建立类似物的培养方法。方法:原代培养人皮肤成纤维细胞,制备鼠尾胶原,将鼠尾胶原溶液、浓缩培养基、NaOH溶液和以血清重悬的成纤维细胞溶液在适当的比例下混合后形成凝胶构建类似物。结果:形成的类似物中成纤维细胞生长状态良好,并且组织块具有一定弹性和抗拉伸能力。结论:①利用鼠尾胶原可以构建类似物,该模型是进行皮肤部位型培养和制作复合皮的关键与基础;②成纤维细胞胶原凝胶复合物有着良好的生物学特性,它是研究成纤维细胞与细胞外基质之间以及细胞之间相互作用的良好模型。
服用胶原蛋白的注意事项:1、大分子胶原蛋白进入人体后需要降解为小分子肽、氨基酸才能被人体吸收,真正有效吸收的成分并不多。2、这些食物多半脂肪含量较高,不适合经常食用。高热量、高脂肪,尤其是油炸食物都容易产生自由基,加速老化。如果能少吃这一类食物,就等于减少了身体被自由基伤害的机会及皮肤出现黑斑、皱纹等的风险。3、孕妇是不能服用胶原蛋白产品,因胶原蛋白是19种氨基酸组成的,其中有几种是不能被胎儿吸收的,容易引起第二特征过早的发育和成熟,不利于出生后的婴儿成长和发育。利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。
鼠尾胶原:1实验制备:实验设备及材料:大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容:1、制备鼠尾胶原(两个同学一组操作)。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。实验步骤:制备鼠尾胶原:1、取大鼠尾巴洗净,75%酒精浸泡5分钟;2、手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的较高,折断尾骨后拉出尾腱;3、将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡;4、重复步骤2、3,直至尾腱量够用;5、吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克)。制备鼠尾胶原:取大鼠尾巴洗净,75%酒精浸泡5分钟。济南鼠尾胶原平均价格
将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。开封鼠尾胶原单价
鼠尾胶原蛋白I型,用那一种胶原酶可以溶解:1.将胶原加入到0.1M 的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。 4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。 在接种细胞前用无菌的水漂洗。开封鼠尾胶原单价