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胶原蛋白分离提纯实验方案:提取鼠尾胶原蛋白的实验步骤: 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行 酶解, 持续一段时间待混合物变成无色、 透明、 粘稠液体后即可在 4℃, 5000g 的离心力下离心 20min, 收集上清即为粗制鼠尾胶原蛋白原液。 2、将一定浓度的氯化钠溶液加入其中,持续搅拌直至白色絮状沉淀 从溶液中析出,继续加入氯化铵直至沉淀不在析出为止,4℃,5000g 的离心力下离心 20min 后获得白色沉淀。 沉淀物加入一定浓度的醋酸 溶液中溶解。 3、将溶解后的鼠尾胶原蛋白溶液继续反复进行盐析处理,重复步骤 2 的过程 2~4 次。 _x000c_鼠尾胶原蛋白经 SDS- PAGE 蛋白质电泳。将黏稠的胶体溶液进行高速冷冻离心处理。重庆鼠尾胶原进货价
鼠尾胶原蛋白的用途是什么:在食品加工领域,鼠尾胶原蛋白用于生产明胶并添加到布丁和棉花糖中。它还可以当作酸奶,冰淇淋,果酱和奶油芝士等食品的增稠剂使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感觉和质地。它还用于生产膳食保健品,据说能让手指甲和皮肤看起来更好。此外,还有基于胶原蛋白的保健品,可用于促进关节健康。在工业应用方面,鼠尾胶原蛋白用于培养容器等实验室设备的内部涂层。设备上的胶原蛋白薄层通常被允许干燥。它还可以用来制造一种凝胶,可当作悬浮细胞的培养基。此外,还可以把它当胶水使用。成都正规鼠尾胶原直销厂家鼠尾胶原蛋白是从老鼠尾巴提取出来的物质。
含细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。加入760μL的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。
胶原蛋白的应用:1.胶原天然的紧密的纤维结构,使胶原材料显示出很强的韧性和强度,适用于薄膜材料的制备;2.大较胶原被用作制造肠衣等可食用包装材料.其独特之处是:在热处理过程中.随着水分和油脂的蒸发和熔化.胶原几乎与肉食的收缩率一致。而其他的可食用包装材料还没被发现具有这品质;3.由于胶原分子链上含有大量的亲水基团. 所以与水结合的能力很强. 这一性质使胶原在食品中可以用作填充剂和凝胶;4.胶原在酸性和碱性介质中膨胀,这一性质也应用于制备胶原基材料的处理工艺中。制备鼠尾胶原:将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡。
鼠尾胶原胶凝程序:胶原蛋白I按以下步骤使其pH达到碱性时凝胶。1)将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。用氢氧化铵使纱布饱和,把盖子放在150mm的培养皿上,暂放置一边。2)将胶原蛋白I均匀涂布在要包被物的表面上,厚度可以根据需要改变,胶原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的盖玻片。 对于直径100mm的培养皿,每个加入约6mL; 对于60mm培养皿添加约2.3mL,对于35mm培养皿添加约1mL。3)将涂有胶原蛋白的盖玻片或带有盖子的培养皿转移到氨蒸气室并暴露三分钟。4)在无菌蒸馏水中(35mm培养皿加5mL,60mm培养皿加10mL等)浸泡涂布的盖玻片或培养皿30min。吸取原蒸馏水并加0.5-1.0mL无菌蒸馏水,放置在层流罩中过夜。5)吸出蒸馏水,用含血清的平衡盐缓冲液溶液代替并保存在2-8°C。胶原蛋白按其应用可以分为食品级、一般级、医药级。武汉鼠尾胶原产品介绍
胶原蛋白(Collagen)是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分。重庆鼠尾胶原进货价
鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬 片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通 过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于 培养瓶内。 实验设备及材料: 大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理 盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容: 1、制备鼠尾胶原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。重庆鼠尾胶原进货价
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