徐州鼠尾胶原单价

鼠尾胶原实验应用：鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。目的：建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果：自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞，细胞角蛋白18表达阳性，免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论：成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法，并且制作简便,成本低廉。利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。徐州鼠尾胶原单价

鼠尾胶原备用胶凝程序：1）在冰上放置以下物品：胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1MNaOH。2）确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3）在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4）在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS（终体积/10）mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积（不要添加到管中直到步骤4.6为止）终体积x终胶原蛋白I浓度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的胶原体积×0.023）mL的无菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水：添加蒸馏水体积=V（终）—V（胶原蛋白）—V(10×PBS）—V（1MNaOH）4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积，混匀，冰上备用。5）胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6）使用时，无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。厦门鼠尾胶原厂家推荐胶原蛋白就像骨骼中的一张充满小洞的网，它会牢牢地留住就要流失的钙质。

鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液(均需要无菌、预冷):10xPBS(可含10mg/L的酚红用于pH指示)或10x培养液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),双蒸水不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul生友鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul10xPBS或10x培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。

鼠尾胶原是一种天然培养基，它具有促进体外培养细胞（特别是上皮细胞）贴壁的作用，同时它也是一种天然的黏附剂，当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片，制备细胞爬片时，可在瓶底涂一层胶原，再放上小玻片，自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法，以及如何切割小玻片，并利用鼠尾胶原将其固定于培养瓶内。实验设备及材料：大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。实验内容：1、制备鼠尾胶原。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。鼠尾胶原对前庭毛细胞具有良好的贴壁黏附促进作用。

鼠尾胶原是一种天然培养基和一种天然的黏附剂，可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。制备鼠尾胶原方法：1、取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟；2、手持尾巴，用止血钳夹住鼠尾的较高，折断尾骨后拉出尾腱；3、将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡；4、重复步骤2、3，直至尾腱量够用；5、吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）；6、将尾腱置于平皿内剪碎，转移至三角烧瓶中；7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；8、摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9、离心，4000转/分，10-15分钟；10、吸取上清，分装成小瓶，4℃保存。将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡。鼠尾胶原销售厂家

当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片，制备细胞爬片时，可在瓶底涂一层胶原。徐州鼠尾胶原单价

含细胞三维胶原凝胶的制备（以配制1mg/mL三维胶1mL为例）准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中（混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要测定pH值）。加入760μL的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存，切勿冻存，有效期一年。徐州鼠尾胶原单价