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实验应用:探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。方法制作鼠尾胶原,观察全细胞膜片钳实验中,自制的鼠尾胶原对前庭毛细胞的贴壁黏附作用。结果无鼠尾胶原时,前庭毛细胞悬浮于外液,不宜封接;有鼠尾胶原时,前庭毛细胞贴附于培养皿底壁,易于封接和长时间(约8h)的观察和记录。鼠尾胶原对前庭毛细胞具有良好的贴壁黏附促进作用。结论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。鼠尾胶原醋酸溶解:将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中。广州正规鼠尾胶原厂家直销
一种海狸鼠尾胶原手术缝合线制备方法,其特征在于,步骤如下:(1)胶原纺丝液的配制:将备用的海狸鼠尾筋切成薄片,用无花果蛋白酶进行酶解处理,再用双氧水溶液杀酶;将杀酶后的切片用蒸馏水冲洗,然后用乙酸溶液溶胀,把溶胀后的切片分散搅拌,然后用滤网过滤,除去杂质及不溶胀物,然后把该溶液离心脱泡制得胶原纺丝溶液;(2)手术缝合线纤维的成形:将胶原纺丝液装入立式向上湿法纺丝机的纺丝液贮罐中,用氮气挤压入含有pH=8-11、质量浓度为50-80%的硫酸钠溶液的立式凝固浴中凝固成型,再经过质量浓度为60-90%的乙醇水溶液的脱水浴脱水,再经过假捻器加捻,合股后再进入含有pH=9-11、质量浓度为0.8-1.2%戊二醛的交联浴中交联,经过水浴水洗,再经第二次加捻,除去水及交联剂,干燥后,在卷绕辊上卷绕即得手术缝合线。青岛鼠尾胶原厂家直销使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。
鼠尾胶原凝胶体在皮肤细胞原代培养中的应用:在国外的药理,毒理和皮肤病学的研究领域中已得到的限翩,否则培养成功率极低.本文采用鼠尾胶原凝胶体作为滋养层,提高了培养细胞的材料和方法r1]实验材料:培养液DEIdE(G皿}ao),表皮细胞生长因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品厂),氢化可的松,胰岛素(Sigm,青,链霉素,胰蛋白酶,]~DTA,细胞培养皿~35mill(00rningrSA).(2)皮肤基底细胞的分离和细胞悬液的制备:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮肤,剪下皮肤后.以消化12h.轻刷表皮面,收集细胞悬液,加入细胞培养液.用梯度离心收集细胞,以3xi0/m]浓度接种平皿.(3)鼠尾胶原凝胶体的制备:具体方法参见文献c13o(4)培养皿的胶原铺制:i.0ml的酸溶解胶原滴入~35mm培养皿中,铺满平皿底部;将平皿暴露于氨气中30min,然后置空气中30rain,散尽剩余氨气。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。
鼠尾胶原胶凝程序:胶原蛋白I按以下步骤使其pH达到碱性时凝胶。1)将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。用氢氧化铵使纱布饱和,把盖子放在150mm的培养皿上,暂放置一边。2)将胶原蛋白I均匀涂布在要包被物的表面上,厚度可以根据需要改变,胶原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的盖玻片。对于直径100mm的培养皿,每个加入约6mL;对于60mm培养皿添加约2.3mL,对于35mm培养皿添加约1mL。3)将涂有胶原蛋白的盖玻片或带有盖子的培养皿转移到氨蒸气室并暴露三分钟。4)在无菌蒸馏水中(35mm培养皿加5mL,60mm培养皿加10mL等)浸泡涂布的盖玻片或培养皿30min。吸取原蒸馏水并加0.5-1.0mL无菌蒸馏水,放置在层流罩中过夜。5)吸出蒸馏水,用含血清的平衡盐缓冲液溶液代替并保存在2-8°C。使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。
胶原蛋白的功效与作用:1、可以作为一种补钙食品。胶原蛋白的特征氨基酸羟基脯氨酸是血浆中运输钙到骨细胞的运载工具,骨细胞中的骨胶原是羟基磷灰石的黏合剂,它与羟摹磷灰石共同构成了骨骼的主体。因此,只要摄入足够的胶原蛋白,就能保证正常机体钙质的摄入量,胶原蛋白可成制成补钙的保健食品。2、可以为特殊人群使用。妇科疾病的根源来自于内分泌失调,胶原蛋白能够改善妇科疾病的困扰,而更年期的妇女更需要胶原蛋白供给身体所需,使得更年期妇女能够更轻松面对各种不适。胶原蛋白按其应用可以分为食品级、一般级、医药级。上海郑州鼠尾胶原
胶原蛋白是一种蛋白质,能帮助连接皮肤,骨头和肌腱等身体组织。广州正规鼠尾胶原厂家直销
鼠尾胶原简介:鼠尾I型胶原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备,纯度达到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养;也可用于制备三维胶原凝胶,使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准:1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞,贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL,pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶,NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。广州正规鼠尾胶原厂家直销