Recombinant Human NKp46/NCR1/CD335 Protein
抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。RANTES是对单核细胞,记忆T细胞(CD4+/CD45RO),嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞的趋化剂。Recombinant Human NKp46/NCR1/CD335 Protein,mFc Tag
Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门切割N-连接糖链的内切酶,用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式,涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶,能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键,从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae),其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成:一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基,这些残基与糖链的特定结构相互作用,导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应,需要水分子的参与。Recombinant Rat PLAU/uPA Protein,His Tag肠激酶能够特异性识别并切割含有Aspartate-Aspartate-Aspartate-Lysine (DDDK) 序列的蛋白质。
IdeSProtease全称免疫球蛋白G降解酶(ImmunoglubulinG-degradingenzymeofStreptococcuspyogenes,IdeS),是由人类致病菌酿脓链球菌(Streptococcuspyogenes)产生并分泌至胞外的一种半胱氨酸水解酶。该蛋白酶具有极高的底物特异性,能识别IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段。IdeS可识别人源和其他多种动物来源的IgG,比如人、兔、猴、绵羊以及人动物嵌合IgG等。IdeS具有独特的底物选择性,可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。本产品利用大肠杆菌重组表达,纯度高,具有良好的酶切活性,是用于表征抗体、Fc融合蛋白和抗体-药物复合物的有价值的工具。产品信息规格2000U/5000U产品性质中文别名(Chinesesynonym)免疫球蛋白G降解酶英文别名(Englishsynonym)IdeSProtease来源(Source)大肠杆菌表达标签(label)N-terminalHisTag纯度(Purity)经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度>95%分子量(Molecularweight)35.3kDa缓冲液组分(Buffer)50mM磷酸钠,150mMNaCl(pH6.6),50%glycerol
IdeSProtease全称免疫球蛋白G降解酶,酶活(Enzymeactivity)40U/μL酶活定义(UnitDefinition)在37℃条件下,反应30min,剪切>95%的1μg重组单克隆IgG所需要的酶量定义为一个活性单位。储存条件-25~-15℃保存,有效期1年。使用方法1.在消化液中加入适量IgG(加至5mg);2.在IgG样本中加入IdeS蛋白酶(每1μgIgG加入1个单位的IdeS);3.将样品置于37℃孵育30-60min。IdeS蛋白酶在中性pH或接近中性pH的缓冲中活性强。推荐反应缓冲是50mM磷酸钠,150mMNaCl(pH6.6),多数常见的生物缓冲也适用,比如Tris或PBS;注意:不在此pH范围(例如乙酸盐缓冲液)的缓冲也可能适用,但是孵育时间或酶量需要根据实际情况进行优化。注意事项1.IdeS不能识别切割小鼠IgG1/IgG2b,大鼠、猪、牛和山羊IgG,对小鼠IgG2a和IgG3具有中等酶切活性,酶切小鼠IgG2a和IgG3建议增加IdeS的用量(推荐用量为正常用量的5-10倍)。2.IdeS不能切割非IgG亚型的单抗分子,包括IgA、IgM、IgD和IgE。透明质酸及其衍生物由于其生物相容性和生物降解性,被用作药物的控释载体。
N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义(UnitDefinition)1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-15~-25℃保存,有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白(1-20μg),至终体积10μL;2)100℃温度下煮沸10min使其变性,冰上冷却,离心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去离子水,总反应体积20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。非变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白(1-20μg)至体积为20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,轻轻混匀。3)37°C孵育4-24h。注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。AFGF在调节细胞存活,细胞分裂,血管生成,细胞分化和细胞迁移中起重要作用。Arg-Gly-Asp-Cys
人血清白蛋白(HSA)是脂类等物质的转运载体,其主要生理功能是调节血浆pH值和维持血浆渗透压。Recombinant Human NKp46/NCR1/CD335 Protein,mFc Tag
CD30活性艾利莎数据:固定化抗CD30抗体,板上的氢氟碳化合物标记为0.5欧氏/毫升(100欧氏/井)。生物化人CD30的剂量反应曲线,以49ng/ml的EC50作为标记。艾丽莎数据:固定了人的CD30配体,他的标签在板上5g/ml(100ml/井)。用酶联免疫吸附法测定人CD30的剂量反应曲线,标记为27.1ng/ml的EC50。产品用Lal法测定每一种蛋白质。制剂在PBS(PPS)中用0.22离子过滤溶液冻干(PH7.4)。通常在冻干前添加5%海藻糖作为保护剂。复溶离心管打开前。建议重组到超过100克/毫升的浓度(冻干通常使用1毫克/毫升溶液)。在蒸馏水中溶解冻干蛋白。运输与保存方法冰袋运输。-20℃至-80℃保存,一年有效期。复溶后,-20至-80°C,在未开封状态下保存3-6个月。复溶后,2-8°C保存2-7天。建议使用时分装冻存,避免反复冻融。注意事项1.避免反复冻融。2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。3.本产品作科研用途!产品数据Recombinant Human NKp46/NCR1/CD335 Protein,mFc Tag