安徽分光分光光度计教程

编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律，测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面，利用荧光分光光度计时，使用荧光强度。在低浓度时，荧光强度与浓度成正比，所以，可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果，对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较，下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中，调配～5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示，根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中，用～5ug/ml的6点和空白样品（蒸馏水）创建，得到了线性度良好的标准曲线（相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中，噪声的影响相对较大，导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。紫外-可见分光光度计应远离发出磁场、电场和高频电磁波的电气装置。安徽分光分光光度计教程

在上述6个容量瓶中对应的溶液中铁的含量不同其中铁含量为，其余溶液构成标准系列溶液。并用移液管吸取，并编号为7。将溶液放置15min左右；3、接通722N分光光度计电源，调节分光光度计的透光度T示数为（即T%=100%）发现此时吸光度A的示数位，波长调节至510nm条件下；4、拿出比色皿，一次只能测四种溶液，先用1、2、3、4号容量瓶中的溶液分别润洗(不能搞混了)，并依次倒入编号溶液（不能倒太满，否则容易溢出），用面巾纸擦干比色皿表面尤其是光滑的一面。将擦干装有对应溶液的比色皿依次放入分光光度计的光路中使测定的顺序为1、2、3、4（要盖上仪器的盖子）。记录对应的吸光度；5、将4上述测完的比色皿拿出，将溶液倒入废液缸中，先用蒸馏水洗净4只比色皿。在按4步骤中的方法进行操作，此时的溶液编号为5、6、7。记录对应的吸光度；6、将记录的数据在电脑上用ORANGE软件进行处理。并绘出相应的图,并根据原理求出原始待测溶液中铁的含量；7、实验完毕断开分光光度计电源，清洗玻璃仪器和比色皿，整理实验台离开实验室。实验数据处理结果记录及讨论标准系列的实验数据及测定结果铁标准溶液/mL铁含量。福建光谱仪分光光度计教程分光光度计之所以优于比色计就在于使用了一个衍射光栅将光源的复色光转换为单色平行光束。

一般来说，紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义，单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物，然后再通过实际样品溶液，就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮（mirroredchopperwheel）将一束光分成两束，分别测量对照样品和实际样品。可以较小化光漂移（lampdrift）和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮，而是利用一种光束分光器来代替，将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度，所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。

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紫外-可见分光光度计可用于大部分有色物质的定量监测,通常需要使用各种各样的显色剂。安徽分光分光光度计教程

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