为什么Tricine凝胶更适用于较小的蛋白质和多肽？

上海归真仪器设备有限公司2023-07-20

Tricine凝胶系统于1987年被Schagger和von Jagow次描述，是Laemmli Tris-甘氨酸系统的改良版，对较小的蛋白质和多肽具有较好的分离效果。在Laemmli系统中，蛋白质“堆积”在多孔的上半部分凝胶（浓缩胶）中，并存在于由凝胶缓冲液提供的高迁移率的“先导”氯离子与电泳缓冲液中提供的慢低泳动率的“尾随”甘氨酸离子边界之间。这些堆积的蛋白质条带在到达分离胶后开始筛分，根据大小进行分离。但是，浓缩胶中十二烷基硫酸盐（DS）离子（来自SDS样品和电泳缓冲液）的连续积累会阻碍较小蛋白质（低于10 kDa）的分离。DS堆积可导致DS离子与较小蛋白质发生对流混合，导致条带模糊和分辨率降低。DS离子与较小蛋白质的混合也会干扰后续的固定和染色步骤。