国内全基因组病毒分析方法

时间:2023年06月14日 来源:

对病毒的全基因组进行测序费用合理,上海探普生物科技有限公司致力于医药、保养,以科技创新实现管理的追求。探普生物拥有一支经验丰富、技术创新的专业研发团队,以高度的专注和执着为客户提供病毒测序,病毒全基因组测序,病毒宏基因组测序,未知病原鉴定。探普生物继续坚定不移地走高质量发展道路,既要实现基本面稳定增长,又要聚焦关键领域,实现转型再突破。探普生物始终关注医药、保养市场,以敏锐的市场洞察力,实现与客户的成长共赢。



高通量测序技术是对传统测序一次性的改变。国内全基因组病毒分析方法

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DNA病毒基因组测序:动物、人、植物被特定病毒株侵染、分离到病毒株、连续传代的病毒株往往都需要获得尽量完整的基因组序列来指导下一步的研究,传统的sanger测序需要了解序列、设计引物、做很多PCR,往往效率很低,而NGS作为一种无需特异性引物扩增的测序方式,可以直接从DNA中获得序列。DNA病毒基因组测序:如果,1,您的目的是:获得一种指定DNA病毒尽量完整的序列;2,您可以提供该病毒的中英文名称;3,您了解样本中病毒的载量情况、培养状况、ct值等任一信息。那么,探普为你准备了完整的下单、样本准备方法,经过探普的实验,测序、分析,你将获得:1,1-5Gb测序数据量rawdata;2,一般可获得95%以上的拼接序列,100kb以上大基因组病毒除外;其他特殊要求如:突变分析、进化分析都可直接与技术支持联系。




国内全基因组病毒测序上哪找病毒全基因组测序具有的特点:无需培养和特异性扩增,对采集临床样本直接检测。

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对病毒的全基因组进行测序时,生物信息学分析工作的进行:生存环境和状态决定了对病毒的全基因组进行测序的下机数据一般都伴随大量的宿主和其他微生物的数据。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,搭载了专门用的的生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,专门搭载了生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。生物信息学流程主要包括对非目标数据进行去除以及对目标序列进行筛选,高质量高完整度的序列拼接以及后续的高级分析,如SNP分析,进化分析,耐药位点分析等。在探普的专门用的流程下,可以获得完整性很高的基因组序列。


全基因组测序要注意的事项:全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。技术路线:提取基因组DNA,然后随机打断,电泳回收所需长度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接头,进行DNA簇(Cluster)制备,后利用Paired-End(Solexa)或者Mate-Pair(SOLiD)的方法对插入片段进行测序。然后对测得的序列组装成Contig,通过Paired-End的距离可进一步组装成Scaffold,进而可组装成染色体等。组装效果与测序深度与覆盖度、测序质量等有关。常用的组装有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。测序深度(Sequencingdepth)是指测序得到的碱基总量(bp)与基因组大小的比值,它是评价测序量的指标之一。测序深度与基因组覆盖度之间是一个正相关的关系,测序带来的错误率或假阳性结果会随着测序深度的提升而下降。测序的个体,如果采用的是双末端或Mate-Pair方案,当测序深度在50X~100X以上时,基因组覆盖度和测序错误率控制均得以保证,后续序列组装成染色体才能变得更容易与准确。


深度测序技术促进了基因检测的普及。

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需要对病毒的全基因组进行测序的应用场景:在探普生物长时间运行过程中,我们接触到的对病毒的全基因组进行测序项目有比较丰富的应用场景。先,从事基因进化/疫苗/药品/抗体研制方向的研究的研究者一定会用到测序。这种场景一般是用密集的sanger测序监测某几个关键基因,搭载一定频率的全基因组测序。这样的组合省时省力省经费,同时能达到研究目的。此外,有的单位需要对传染病的病原进行流行病学监测和研究,如疾控/疫控中心、医院的传染病科室以及一些高校和研究所的相应课题组,可能需要对病毒的全基因组进行测序以后,结合其他上下游的研究数据,达到研究或者监测疫病的目的。



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对病毒全基因组进行测序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列。国内全基因组病毒分析方法

病毒全基因组测序定中为了便于新发或罕见病毒性传染病的筛查检测,利用多重置换扩增技术,以负链RNA病毒—发热伴血小板减少综合征病毒和正链RNA病毒—登革病毒为模拟样本探索临床样本中RNA病毒基因组非特异性扩增方法。研究中通过梯度稀释的RNA病毒模拟样本中可能存在的不同丰度的病原体,样本核酸依次加工成单链cDNA,双链cDNA,T4DNA连接酶处理后的双链cDNA以及添加外源辅助RNA后合成并连接的双链cDNA形式,然后进行Phi29DNA聚合酶等温扩增,使用荧光定量PCR方法比较各种方法对RNA病毒核酸扩增的影响。


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