浓度精子分析VAP
定量测定是医学发展的重要保证。WHO1980年出版了男科实验室手册***版及以后版本[1]对有关男科的实验进行了详细的阐述。对计算机辅助精子分析进行质量管理包括:计算机本身的软硬件、CASA分析结果、工作人员的具体操作几方面。CASA参数包括精子数量和各种活动力变量其质量包括所测得数据的可靠性、精确度、如何避免差错和数据的正确性及确认以及分析中的标准[2]。
CASA质量管理关系到男科实验室中**分析的质量具有以下特点:⑴在实验室内部质量和医生处置质量方面优于其它测定精子运动的方法;⑵CASA结果及结果质量的评估较困难;⑶WHO标准是医生处置质量保证的基础;⑷今后应加强操作人员的培训。 男性精液检测主要依赖计算机辅助精子分析仪(computer assistant semen analyses,CASA)。浓度精子分析VAP
CASA,即计算机辅助精子分析,是一种利用技术手段对精子活力、浓度和形态进行精确评估的方法。WHO第五版指南强调,相比人工检测,CASA提供更准确的数据和精子动力学参数,如前向运动和超活化运动,以及获能精子特征参数。研究显示,CASA检测的精子参数与体内外受精成功率和受孕时间有***关联。使用CASA分析仪,通常通过相差显微镜识别活动精子,适用于精子动力学分析。但要确保可靠结果,操作者需注意标本制备、帧频率、精子浓度等因素。每份样本至少需要分析200个活动精子的运动轨迹,更多精子样本有助于分类和变异性的分析。国内已有自主研发的精子分析仪,通常进行两次分析,每次至少200个精子,结果通过统计学分析得出。CASA在评估精子浓度时,需精确测量精子体积,确保**完全液化并充分混匀。计数板的精确性和计数一致性是关键,每次检测需满足5个视野和200条以上精子的比较低要求。对于高浓度**,可能需要稀释以减少误差。形态分析方面,CASA能够定量评估精子头部、中段和主段,尾部缺陷可通过活力评估。对于碎片过多或黏稠的**,可能需要洗涤以减少背景干扰。CASA中涉及一系列术语,如VCL(曲线速度)、VSL(直线速度)等,它们反映了精子运动的不同特性。精子分析LINCASA系统用量少,检测速度快,能够显著提高实验室的工作效率。
CASA系统在男性生殖能力检验应用中的功能要求和参数设置CASA是将现代化的计算机技术和先进的图象处理技术应用于精子质量的临床检验,通过对精子动(静)态图象中精子特性的***分析,为临床提供有关精子质量各项指标的准确数据。CASA系统一般包括硬件和计算机软件支持系统几个部分:(1)相差显微镜、恒温装置和**技术板(Makler板、Macro板或MicroCell计数池等);(2)高速、高分辨率的摄像机和电视监视器组成的摄像系统;(3)计算机分析处理系统及打印机打印输出。
精子手工计数原理及操作方法
1.原理:将精液用适当的稀释液作一定量稀释后,混匀注入计数池内计数,再算出每毫升精液中精子数。2.方法(按照***版第四版《全国临床检验操作规程》)1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式:精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,摆动性(WOB):实际的曲线路径关于平均路径的摆动值。
七、精子形态检查[正常参考值]畸形精子:<10%-15%; 凝集精子:<10%;未成熟精细胞:<1%。[临床意义]1.精索静脉曲张病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟时已进入精液,或静脉回流不畅造成阴囊内温度过高和睾丸组织缺氧,或血液带有毒性代谢产物从肾或肾上腺静脉逆流至睾丸,上述原因均有损于精子形态。2. 精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能异常。3. 睾丸曲细精管生精功能受到药物或其他因素影响或伤害时,精液中可出现较多病理性未成熟精细胞。
八、精液细胞检查[正常参考值]白细胞(WBC):<5个/HP(高倍镜视野);红细胞(RBC):0-偶见/HP。[临床意义]1.精液中白细胞增多,常见于精囊炎、前列腺炎及结核等。2.精液中红细胞增多,常见于精囊结核、前列腺*等。3. 精液中若查到*细胞,对生殖系*有诊断意义。 CASA系统主要用于精子动力学的分析,可以评估精子的浓度、活力等参数。北京精子分析DSL
IVOS具有高分辨率和高灵敏度的特点,能够捕捉到微小的细节和变化,进一步提高了精子分析的准确性。浓度精子分析VAP
CASA可将每个精子的活力按以下分级:(1)前向运动型(PR):精子运动活跃、线性运动或者在较大的范围内运动。(2)非前向运动型(NP):所有其他非前向运动的形式,如精子在较小的范围内运动,精子头部轻微移位或只观察到尾部摆动。(3)完全不动型(IM):精子完全不动。CASA系统检测的这些参数有一套标准的术语。(1)VCL=曲线速度(mm/s)。精子头沿其实际的曲线,即在显微镜下见到的二维方式运动轨迹的平均速度。检测细胞活力。(2)VSL=直线速度(mm/s)。根据精子头在开始检测时的位置与***所处位置之间的直线运动的时间平均速度。(3)VAP=平均路径速度(mm/s)。精子头沿其空间平均轨迹移动的时间平均速度。(4)ALH=精子头侧摆幅度(mm)。精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。以侧摆的最大值或平均数值表示。(5)LIN=直线性。曲线轨迹的直线性。即VSL/VCL。(6)WOB=摆动性。精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性。空间平均路径的直线性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打频率(Hz)。精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。(9)MAD=平均移动角度(度)。精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均***值。浓度精子分析VAP
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