吉林转染试剂用血清和培养基的区别

LNCap 细胞的培养和传代严格由 ATCC 建议的操作步骤进行，与 pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和 pEGFP-N3（1:1，共 1.0 微克）共转染（6 孔板中每孔的量），并用 LipoD293™ 试剂（左图）和 Fugene HD（右图）分别按照生产制造商的科学实验步骤进行转染。转染 24 小时后，用尼康 Eclipse 2000 荧光显微镜检测 GFP 荧光，以此来评价转染效率。在血清和***的存在下，HepG2 和 SaoS-2 细胞用 pEGFP-N3 和 pSV-β-半乳糖苷酶 DNAs 分别转染达到 95% 的细胞融合。转染 48 小时后，分别通过 Zeiss 510 激光共聚焦显微镜和 β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测效率。采用siRNA转染试剂可以将siRNA轻松导入细胞内。吉林转染试剂用血清和培养基的区别

转染是将外源核酸导入真核细胞的过程，是细胞和分子生物学研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物领域的科研党们绕不开的话题。然而常常听到的抱怨是"转染效率太低""转染完细胞全漂了""转染后忘记给细胞换液了"，真所谓辛辛苦苦实验N多回，一夜回到解放前……

众所周知，影响转染成功的因素非常多，包括细胞质量、核酸质量、微生物污染、转染试剂等。各种细胞使用的转染条件都可能不同，现实中也并没有一种放之四海而皆准的方案。 怎么配制转染试剂的ph惊艳登场!临床级******毒载体生产必备转染试剂.

用LipoFectMax™转染Hela细胞，左图转染GFP cDNA，右图共转染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。

4适用于神经细胞的转染图4.  用LipoFectMax™ 和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白（GFP），转染24小时后观察转染效果，LipoFectMax™ 转染效率（左图）比LipoFectamine®2000（右图）高5倍。

LipoFectMax™ 转染试剂转染试剂操作流程

在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。

2.高灵活应用， 同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。

3.细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。

4.兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液(如无血清培养基)。

图4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nM HPRT特异性siRNA转染至4种细胞。 通过LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。 连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理。

基于阳离子聚合物的转染试剂，带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞。其又分为树枝状阳离子聚合物和线性阳离子聚合物两类，前者细胞毒性相对较大，后者细胞毒性较小，但其转染效率都高于脂质体转染，适用也较为广范。

以上单一成分的转染试剂或聚焦于提高效率或着重于降低细胞毒性，可谓鱼和熊掌不可兼得也。

新一代转染试剂，不局限于单一成分，混合了不同**配方的脂类（非脂质体）、加上蛋白质组分、以及各种的**成分，兼具了转染效率高和细胞毒性小的优势，且操作更加简单，易于高通量。

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转染的细胞类型可简单分为两大类，连续细胞系和原代细胞。吉林转染试剂用血清和培养基的区别

用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得：只需简单地混合，并进行孵育（30min）、稀释、及注射即可。

高效、靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果

图4. 使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物，以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射，**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低（使用TaqMan分析对敲低进行评估）。 吉林转染试剂用血清和培养基的区别