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LNCap 细胞的培养和传代严格由 ATCC 建议的操作步骤进行,与 pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和 pEGFP-N3(1:1,共 1.0 微克)共转染(6 孔板中每孔的量),并用 LipoD293™ 试剂(左图)和 Fugene HD(右图)分别按照生产制造商的科学实验步骤进行转染。转染 24 小时后,用尼康 Eclipse 2000 荧光显微镜检测 GFP 荧光,以此来评价转染效率。在血清和***的存在下,HepG2 和 SaoS-2 细胞用 pEGFP-N3 和 pSV-β-半乳糖苷酶 DNAs 分别转染达到 95% 的细胞融合。转染 48 小时后,分别通过 Zeiss 510 激光共聚焦显微镜和 β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测效率。pei转染试剂说明书是什么?北京dmrie c转染试剂
细胞转染实验是生物医学实验室中**常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。
目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用***等微生物作为基因导入载体,以慢***、腺***和腺相关***等**常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。
物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因***,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都很性感
电转化
化学转染方法是生物医学研究中**常用的转染方法,主要包括两类:阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。 hek293t转染试剂怎么样3.0试剂进行转染的每个个体间所检测的生物标志物的水平与未注射该试剂的个体相比并没有***差异。
对 CHO 细胞转染效率的比较
右图:使用以上转染试剂将编码荧光素酶蛋白的 cDNA(phRL-CMV)和绿色荧光蛋白 GFP 的 cDNA 按照生产商的提供的转染步骤分别转染到 CHO 细胞。在转染 24 小时后,荧光素酶的活性使用 Beckman 公司的化学发光监测器测定;GFP 阳性细胞率使用 BD 公司的 FACS 检测。
左图:LipoD293 试剂(升级版)和 Lipofecatmine 2000(L2K), TransIT 以及 Fugene 6 的价格比较(美元/1000 微升)。所有的价格是从生产制造商的网站上收集
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右图:使用以上转染试剂将编码荧
图7. 对注射了Invivofectamine 3.0 试剂的小鼠样品进行血液化学分析。将Invivofectamine 3.0试剂与靶向FVII的Ambion in vivo siRNA的复合物分别以1 mg/kg [1], 3 mg/kg [3], 或未处理[U]的剂量注射入小鼠体内。在注射后2、24及48小时收集血液样品,并通过临床化学检测方法对数个生物标志物(Antech)进行评估。结果表明在使用Invivofectamine 3.0试剂进行转染的每个个体间所检测的生物标志物的水平与未注射该试剂的个体相比并没有***差异。 除了以上两种专用于siRNA的转染试剂,还有通用型转染试剂Lipofectamine™ 2000,Lipofectamine™ 3000和Neon™转染系统也可以用于siRNA转染我们希望把mRNA转染进入原代细胞,那**适合的转染产品就是Lipofectamine MessengerMAX™或是Neon电转仪。
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功能介绍 美国 Zeta Life公司是国际无血清细胞培养基 DMEM/F12主要完成人,有三十多年的胎牛血清、无血清细胞培养基生产经验; Zeta Life与美国加利福尼亚大学联合开发全球细胞体内可代谢转染试剂,此技术成为全球细胞转染优先技术之一。 7月17日 收录于话题Zeta Life Advanced DNA RNA,AD600150转染试剂;
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从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。北京dmrie c转染试剂
用LipoFectMax™转染Hela细胞,左图转染GFP cDNA,右图共转染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。
4适用于神经细胞的转染图4. 用LipoFectMax™ 和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白(GFP),转染24小时后观察转染效果,LipoFectMax™ 转染效率(左图)比LipoFectamine®2000(右图)高5倍。
LipoFectMax™ 转染试剂转染试剂操作流程
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