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CellCountingKit-8（简称CCK-8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazandye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。cck8试剂盒原理是什么a?湖北cck8增殖

再此，给大家分享个小事情，有次，因为实验时间点已经到，但是盒子不够，我们就用了某天的CCK-8试剂盒，***出来的结果如图3。这个结果是我所不能接受的。后来用Sigma的再重复了一次，如图4，这种有深有浅的才是该有的结果。我想说的是在有能力选择范围内，尽量选择好一点的试剂，免得浪费时间。后来博士换了导师，换了课题，没有再用Sigma的了，用了一个日本的牌子，名字和货号如下，结果只能说justsoso，肯定没有Sigma的好用。二次湖北cck8增殖CCK8细胞增殖实验检测原理.

在做一些***毒性试验时，比如做铁死亡途径时，我们加入一个***叫C1，这个时候就需要提前换液，其实我们试过，还是会有一些影响。所以这时我们用中性红检测。我们实验室，通常会用20%的硫酸铜溶液放到细胞孵箱下层，预防******。理应说，硫酸铜分子在水溶液中是硫酸根离子和铜离子，是不会挥发的。但是每次只要是新换的硫酸铜溶液再做CCK-8，结果总是不好，我也不知道是什么原因。之前在我们实验室有发生过这样的事情，这种有深有浅的才是该有的结果。我想说的是在有能力选择范围内，尽量选择好一点的试剂，免得浪费时间。

五、实验注意事项：·若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。·如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK8之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉***影响。当然***影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。·当使用标准96孔板时，贴壁细胞的**小接种量至少为1,000个/孔(100μl培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μl培养基)。在CCK-8试剂盒中，**主要的化学药品是WST-8.

cck8试剂加入后孵育时间，随着时间的增加，OD值就会增大。总之原则就是把OD值控制在1.0左右。这里我考察了0.5h、1.0h、2.0h。再说一下关于种板设置问题。众所周知周围一圈孔因为边缘效应都是不用来做实验的。一般每组样品我会设置6个复孔，得到的OD值去掉**大值与**小值，其余取平均值。我用的是排***，会省很多力气，但是也会增大组内误差。这个只有通过校正移液***和选用**适***头了。能力有限，表达不清的大家凑合着看看吧。有疑问的欢迎大家留言讨论，我们的目标是共同进步胞毒性非常低，因此加入WST-8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到比较好测定时间。江苏细胞增殖cck8实验报告

接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不一致。湖北cck8增殖

CCK8，即Cell Counting Kit-8，与MTT法的主要区别如下：一、原理不同1、Cell Counting Kit-8：CCK-8 试剂盒利用了日本同仁化学研究所（Dojindo）开发的四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)。2、MTT法：其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臜，用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。湖北cck8增殖