湖北cck8实验注意事项

在培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时，还应考虑***的吸收，可在加入***的培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450nm的吸光度作为空白对照。·金属对CCK-8显色有影响：当终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会***5%、15%、90%的显色反应，使灵敏度降级。如果终浓度是10mM的话，将会*****。·悬浮细胞由于染色比较困难，一般需要增加细胞数量和延长培养时间。·加入CCK-8时，如果细胞培养时间较长，培养基颜色或pH值已变化，建议换用新鲜的培养基。·用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定，且要擦拭干净样品板了。不同的种板数对检测***的IC50影响大吗？湖北cck8实验注意事项

细菌***对CCK8检测的影响：我们做***的，经常会做到细菌或***对细胞的影响。那这种情况下我们应该怎么办。其实细菌防御系统还是非常强大，单独和CCK-8在一起孵育时，不会发生还原反应，几乎不会和细菌发生显色反应。而细菌不需要入胞繁殖，所以结果还是可信的。**讨厌的就是***，我不知道有多少人是做***的。***是需要入胞繁殖的，而且需要借助细胞的东西来进行繁殖。繁殖过程中就需要消耗宿主的能量，会产生氧化还原反应，所以我用CCK-8来测定***对细胞活性的影响或者某个***对***复制的影响时，我都小心翼翼的测很多个时间点，说实话，效果不是很好。所以我比较喜欢中性红。湖北cck8实验注意事项这个CCK-8的英文全称是Cell Counting Kit-8.

CCK法的操作步骤（更多内容请见说明书）：实验一：细胞活性检测1、在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（37℃,5%CO2）。2、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。5、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。

CCK-8的用途1.细胞增殖测定：细胞增殖实验在很多领域都会用到，比如**相关、损伤后修复等。2.***筛选：在测定一个***的毒性和安全有效浓度时，经常会用到CCK-8。3.细胞毒性测定：这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响，比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。4.**药敏试验：这个是用的比较广的，我见过做**的团队，买CCK-8都是一整箱，一整箱的买，比如果子老师所在的团队，哈哈哈。5.微生物对细胞的毒性或增殖的实验***筛选：在测定一个***的毒性和安全有效浓度时，经常会用到CCK-8。

酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰；◆细胞毒性非常低，因此加入WST-8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到比较好测定时间。实验二：细胞增殖-毒性检测1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（37℃，5%CO2）。2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。4、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。MTT与CCK8比色法的实验细节和注意事项.上海cck8细胞

CCK8的实验步骤、实验分组及检测方法.湖北cck8实验注意事项

细胞增殖-毒性检测1.在96孔板中配制100ml的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃，5%CO2的条件下)。2.向培养板加入10ml不同浓度的待测物质。3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6,12,24或48小时)。4.向每孔加入10mlCCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响O.D值的读数)。5.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。7.如果暂时不测定O.D值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10ml0.1MHCl溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK-8之前更换新鲜培养基，去掉***的影响。当然***影响比较小的情况可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。湖北cck8实验注意事项