北京cck8实验数据如何处理

时间:2022年02月12日 来源:

二、优点:·使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;·CCK-8法能快速检测;·CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;·CCK-8法的重复性优于MTT法,MTT实验生成的formazan不是水溶性的,需要使用DMSO等有机溶剂溶解;而本方法产生的formazan是水溶性的,不但省去了溶解步骤,更因此而减少了该操作步骤带来的误差;·CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取比较好测定时间,与MTT方法相比线性范围更宽,灵敏度更高;·CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。不同的种板数对检测***的IC50影响大吗?北京cck8实验数据如何处理

1、种板数:这个要查文献,看你所用细胞别人有无做过,把范围大致找出。记住还要参考说明书,这个很重要。然后稀释一系列浓度种板。首先你要观察多长时间细胞可贴壁完全,一般贴壁生长24小时。然后还有在你的实验时间内,不同细胞数下孔内生长情况。比如我拟定考察4天的时间,那么在4天内,细胞是刚好铺满还是堆积生长?因为每块板都会设置对照孔,也就是含有细胞的培养基+CCK8,这个数值是板上的比较大数值,CCK8试验比较好OD值在1.0附近,所以这个比较大数值比较好能控制在1.0左右。我的实验经验是不要让细胞长满,一旦长满了很难去判断是否堆积生长了,对***能否顺利进入细胞有影响此为其一,其二生长不均匀易导致孔间OD值数据偏差大,而且OD值也很大。天津cck8 日本生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比.

细胞增殖实验就是对细胞生长的测定,常用的方法有MTT、CCK8以及流式检测。阅读大量文献发现,如果想证明一个***或者说是一个作用条件对细胞生长的影响,基本上大家都采用MTT或CCK8结合流式的双标准来证明作用效果。所以,***先给大家介绍一下MTT和CCK8比色法的实验操作和注意事项。MTT实验操作1、在96孔板中培养细胞,设置对照组(细胞+无血清培养基)、实验组和空白组(无血清培养基),可以采用如下图的排版方式:2、在对照组和实验组中,

3、24小时后,吸出培养基,对照组和空白组每孔各加入100ul无血清培养基,实验组每孔加入100ul基础培养基配制的***,继续作用12或24小时;4、***作用完毕后,每孔加入50ulMTT,继续作用4小时;5、弃掉每孔中的MTT,每孔加入150ul的DMSO或异丙醇。然后震荡10分钟,使孔底的紫色结晶充分溶解;6、在酶联免疫机器上测定吸光度,波长为550nm或490nm。7、细胞存活率=(实验组吸光度值-空白组吸光度值)/(对照组吸光度值-空白组吸光度值)***。酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰;

酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰;◆细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到比较好测定时间。实验二:细胞增殖-毒性检测1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5%CO2)。2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。4、向每孔加入10μLCCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。CCK8系列简称终于来了.北京cck8注意事项

**药敏试验:这个是用的比较广的,我见过做**的团队,买CCK-8都是一整箱,一整箱的买。北京cck8实验数据如何处理

CCK8检测细胞增殖/毒性的注意事项:1.加入CCK8溶液时不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数;2.要设计空白对照组;3.对于大多数情况,加入CCK8溶液后,孵育2h左右就可以了;4.使用酶标仪之前要提前开启10min预热;5.若连续多天检测,必须保持所有条件一致。相关链接:CCK8的特性、保存方法以及与BrdU的区别CCK8空白对照,测定参比波长的设定以及OD值的合适范围CCK8标准曲线、检测时间、终止反应以及减少加样误差的方法外界因素(金属/***/细菌/培养基/培养板)对CCK8测定的影响细胞因素(预培养/生长方式/状态/细胞数/死细胞)对CCK8测定的影响细胞增殖到底用MTT还是CCK8呢?北京cck8实验数据如何处理

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