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七、精子形态检查[正常参考值]畸形精子：＜10%-15%； 凝集精子：＜10%；未成熟精细胞：＜1%。[临床意义]1．精索静脉曲张病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟时已进入精液，或静脉回流不畅造成阴囊内温度过高和睾丸组织缺氧，或血液带有毒性代谢产物从肾或肾上腺静脉逆流至睾丸，上述原因均有损于精子形态。2. 精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能异常。3. 睾丸曲细精管生精功能受到药物或其他因素影响或伤害时，精液中可出现较多病理性未成熟精细胞。

八、精液细胞检查[正常参考值]白细胞(WBC)：＜5个/HP(高倍镜视野)；红细胞(RBC)：0-偶见/HP。[临床意义]1．精液中白细胞增多，常见于精囊炎、前列腺炎及结核等。2．精液中红细胞增多，常见于精囊结核、前列腺*等。3. 精液中若查到*细胞，对生殖系*有诊断意义。 传统的CASA系统仍使用传统阈值图像处理方法，准确率有待提高。美国狗精子分析ALH

CASA系统也可用于精子形态学评估。CASA系统可用来定量分析精子头部形态学、中段甚至主段的形态，可以把精子头部和中段分类为正常或者不正常，还可以给出头部和中段尺度、头部椭圆率和匀称性的均数、标准差和中位数，以及对染色的精子顶体区进行测量[3]。

与人工操作相比，自动化系统更具客观性，精确度和重复性的潜力[4]。精确度和重复性不低于7%[5]，这优于有经验的技术人员的手工评估。两个研究已经提示在CASA结果与生育力之间存在***联系。Coetzee等发现自动分析的正常精子形态的结果是预示体外受精率和妊娠率的有意义指标[6]。Garrett等发现**中能与透明带结合的、具有某些头部形态特征的精子所占的百分比（Z%），和直线速度（VSL）的精子的百分比，与大样本的低生育力夫妇的自然妊娠率是有***且**的关系。Z%和VSL与生育力间的关系显示是连续的，而且没有显示临界值；高于临界值，妊娠率也不会进一步增加[7]。 香港慢速运动精子分析VSLHAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数，直线性（LIN）‌：曲线轨迹的直线性。

前沿性检查：目前不作为生育力低下男性初步评估的常规方法。这一部分包括了非常专业化的、主要用于研究的方法和其他新兴检测技术。有研究认为，氧化应激可能是影响人类精子功能和妊娠结局的重要因素；新的证据也表明了精子DNA完整性和染色质组装与生育力的关系。前沿性检查一节中详细介绍了精子氧化应激和活性氧实验、精子染色质检测(苯胺蓝和色霉素A3染色)的具体实验操作及讨论。手册重写了计算机辅助精子分析(CASA)部分，强调了CASA对于检测精子浓度的局限性与质控要求，增加了CASA检测精子超活化运动的内容。对精子跨膜离子流和转运的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。为此，手册新增了检测精子跨膜离子流和转运的内容。

CASA系统进行**分析应注意以下几点：

3.2**分析仪阈值的确定（1）精子灰度、对比度阈值：由于分析仪是根据灰度的高低来判断精子的真伪，对亮度和对比度要求特别高，检测时应多次试用，寻找能准确识别精子的比较好灰度阈值[8]。（2）碎片：测定精子浓度准确性受**中细胞成份和非精子的颗粒物质的干扰，测定活动精子的百分率也受精子中非精子物质的影响[9]，这些也是需要注意的。对于系统误认为精子的非精子成分，如精原细胞、白细胞和非白细胞颗粒等，可人为准确记数后在可删除杂质一栏将其舍去。3.3出现1次异常结果应间隔复查反复检查2�3次方能得出比较正确的结果。3.4对于无精子的患者应仔细进行视野检查注意不要将杂质误认为精子计数在内，应将**3000ɡ离心15分钟后，再涂片检查，确认无精后再出报告。 IVOS已成为快速、准确、稳定可靠的进行精子分析的代名词。

CASA系统虽然有诸多优点，但是很多因素都会影响到CASA仪器的使用及准确性。CASA系统进行**分析应注意以下几点：3.1标本的采集与制作（1）采集前禁欲2�7天，禁欲时间过长、过短对**质量都有一定影响。（2）容器要清洁。（3）特殊情况下，*可使用专门为采集**设计的无毒性避孕套，普通的乳胶避孕套因含有损害精子活力的物质不可使用。（4）注意保温（20�37℃），并于30分钟内送检验科。（5）标本置于37℃水浴.精子运动参数具有温度敏感性，因此要求计数池应于分析仪恒温板上预温。（6）密切注意**液化的情况，确保液化时间准确，因**样本随放置时间的延长，精子活动力及活动率有减少的趋势。标本液化后取混匀样本**1滴滴在样品池中间，然后进行分析。（7）检测精子活动力，标本密度应控制在2×106/ml到50×106/ml之间。具有高密度（如高于50×106/ml）精子的标本，通常会增加碰撞的频率，并可能由此出现错误的结果。在这种情况下，建议用同源精浆稀释标本。Hamilton Thorne精子分析仪具有高度的可靠性和稳定性，能够长时间稳定运行，保证数据的准确性和可重复性。香港慢速运动精子分析VSL

精子分析仪节省时间，提高实验室的工作效率，让医生和科研人员更快速地获取实验分析结果。美国狗精子分析ALH

人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。美国狗精子分析ALH